[发明专利]牙龈卟啉单胞菌促血凝功能结构域HGP44基因的克隆重组菌及构建方法无效
申请号: | 201010202399.3 | 申请日: | 2010-06-13 |
公开(公告)号: | CN101942410A | 公开(公告)日: | 2011-01-12 |
发明(设计)人: | 陈晖;朱海华;邓淑丽;张琦霞;崔红花;张卫东;鲍建芳 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/31;C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 刘晓春 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 牙龈 卟啉 单胞菌促 血凝 功能 结构 hgp44 基因 克隆 重组 构建 方法 | ||
1.牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)促血凝功能结构域Hgp44基因的克隆重组菌,它是Hgp44-pET22b-BL21(DE3)大肠埃希氏菌,其保藏编号为CGMCC NO.3799,其拉丁学名为Escherichia coli。
2.权利要求1所述的克隆重组菌的构建方法,其特征在于它包括以下步骤:
1)、通过PCR方法克隆得到Hgp44基因;所述Hgp44基因序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,PCR扩增的引物为:
上游5`-CCATATGAGCGGTCAGGCCGAG-3`
下游5`-GCTCGAGTGCCGTAATCGTCTCTTC-3`,
2)、通过酶切连接方法将Hgp44基因连接到表达载体pET 22b,形成质粒Hgp44-pET22b;
3)、将构建的Hgp44-pET22b载体转化到受体菌coli.BL21(DE3)中,获得克隆重组菌Hgp44-pET22b-BL21(DE3)。
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