[发明专利]一种生产铁皮石斛的方法

权利要求书

1.一种生产铁皮石斛的方法，其特征在于：所述的方法是固体组织培养铁皮石斛拟原球茎的方法，包括外植体的选择诱导、增值培养和继代培养，具体包括如下步骤：

(1)无菌苗的选择和处理

从无菌瓶中取出株高约3～10cm的种苗，无菌条件下用解剖剪刀将植株的茎剪成1cm长的带节的外植体，叶或根剪成1cm长的外植体；

(2)拟原球茎的诱导和增殖

将切好的外植体平放接种到拟原球茎诱导和增值培养基中，每个组合接10瓶，每培养瓶接种5～10个外植体，诱导和增值培养基为MS+蔗糖20g/L+琼脂4.5g/L+NAA 0.5mg/L+6-BA 2mg/L，调整pH＝5.8，控制培养温度(25±1)℃，光强50μmol·m^-2·s^-1，每天光照12h；

(3)拟原球茎继代培养方法

将诱导出的拟原球茎在原诱导培养基中继代一次后，转入继代培养基上继代培养，培养条件MS+NAA 1.0mg/ml+6-BA 0.5mg/ml+蔗糖20g/L+琼脂4.5g/L，光照时间12h/d，光强100μmol·m^-2·s^-1，培养温度：25±1℃，pH＝5.8。

2.按照权利要求1所述的生产铁皮石斛的方法，其特征在于，所述的拟原球茎诱导和增值培养中：培养周期：20～40天，培养温度：20～30℃，光照时间：8～24小时/天，光照强度：50～80μmol/m^-2·s^-1；所述的诱导培养基为：MS培养基+蔗糖20～30g/L+琼脂4～6g/L+α-萘乙酸2.0～3.0mg/L+6-苄氨基嘌呤2.0～3.0mg/L，pH值为5.5～6.5。

3.按照权利要求1所述的生产铁皮石斛的方法，其特征在于，所述的拟原球茎继代培养中：培养周期：20～40天，培养温度：20～25℃，光照时间：8～24小时/天，光照强度：50～80μmol/m^-2·s^-1；所述的大规模培养基为(如上权利要求中并未提到大规模培养基)：MS培养基+蔗糖30～40g/L+琼脂4～6g/L+α-萘乙酸2.0～3.0mg/L+6-苄氨基嘌呤2.0～3.0mg/L，pH值为5.5～6.5。