[发明专利]一种利用乳清发酵生产丁二酸的方法

权利要求书

1.一种利用乳清发酵生产丁二酸的方法，采用产琥珀酸放线杆菌Actinobacillussuccinogenes NJ113在含30～100g/L乳糖的乳清的培养基中发酵产琥珀酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的具体方法是：

(1)种子培养：在100mL血清瓶中进行加入种子培养基为20～80mL，通入N₂和CO₂的混合气；冷却后接入产琥珀酸放线杆菌Actinobacillus succinogenes NJ113培养；

(2)发酵产酸：在5L发酵罐中加入发酵培养基体积为2～4L，接种量为3～7％(v/v)，温度为35～40℃，通入含有N₂和CO₂混合气以保持发酵体系的厌氧环境，搅拌转速在100～300rpm发酵时间为30～60h。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的步骤(1)中种子培养基(g/L)为：葡萄糖10(分消)，酵母膏5，NaHCO₃ 10，NaH₂PO₄·2H₂O 9.6，K₂HPO₄·3H₂O 15.5；pH 6.8，121℃灭菌15min。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的步骤(1)中的种子培养条件为：温度30～40℃，摇床转速100～200r/min，培养时间10～16h。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的步骤(2)中发酵培养基(g/L)为：乳清(按含乳糖计)30～100，酵母膏0～10，KH₂PO₄ 3，MgCl₂·6H₂O 0.3，CaCl₂0.3，NaCl 1，Na₂HPO₄ 0.31，NaH₂PO₄ 1.6。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述的步骤(2)中发酵培养基中乳清含量为按含乳糖计70g/L。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述的步骤(2)中发酵培养基中酵母膏含量为6g/L。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的乳清为工业生产奶酪的副产物，经真空干燥后含75～80％(w/w)乳糖。