[发明专利]分枝杆菌菌种检测膜条及试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及分枝杆菌菌种检测领域，尤其涉及一种分枝杆菌菌种检测膜条及试剂盒。

背景技术

根据国际分枝杆菌分类工作组研究确定，将分枝杆菌分为三大类(Runyon分类法)：

一、缓慢生长菌群

1.结核菌群：包括人型结核杆菌，牛型结核杆菌，非洲分枝杆菌，田鼠分枝杆菌。

2.I群光产色菌。特点是在暗处培养时菌落颜色不明显，在增殖期接触光线1小时后菌落呈林柠檬色。如：堪萨斯、海分枝杆菌等。

3.II群暗产色菌。特点是在暗处培养时菌落呈橘黄色，S型。长期暴光则呈赤橙色。如：瘰疠、戈氏分枝杆菌。

4.III群不产色菌。特点是一般无色素产生。如鸟型、胞内、溃疡分枝杆菌等。

二、迅速生长菌

即IV群菌，特点是快速生长。包括偶发、龟、耻垢分枝杆菌等。

三、需要特殊营养菌

包括麻风分枝杆菌、鼠麻风分枝杆菌、副结核分枝杆菌。

Runyon分类法中的I、II、III、IV群分枝杆菌又称为非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria NTM)。

结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌以外的非结核分枝杆菌(NTM)引起的疾病称为非结核分枝杆菌病，可累及淋巴结、皮肤、软组织和肺。非结核分枝杆菌感染肺脏，引起肺部病变称为非结核分枝杆菌肺病。非结核分枝杆菌(NTM)在世界上报道的有150多种，其中命名了54种，有致病性的分枝杆菌有37种，中国境内分离出了20多种。

NTM是一种环境分枝杆菌，大部分是腐物寄生菌，主要存在于自然环境中，现在普遍被接受的观点是，人可从环境中感染NTM而患病，水和土壤是重要的传播途径，人与人之间传播尚未得到证实，但可以通过动物传染给人。

世界各国由于地理、环境、气候的不同，各国经济、文化水平、医疗技术水平的差异和对疾病的调查方法、标准不同，NTM病流行情况千差万别，但目前几乎是结核病倾向减少，NTM病有逐渐增加趋势。

1979年我国第一次结核病流行病学抽样调查显示，8省市52万人痰菌培养阳性681份，经菌种鉴定29株为NTM，分离率为4.3％。1990年第三次全国结核病流行病学抽样调查结果显示，NTM感染率为15.35％，浙江省最高为44.89％。2000年全国流调中NTM菌株占11.1％。

非结核分枝杆菌致病性有如下特点：

(1)老年人身患多种疾病易发病。非结核分枝杆菌通常作为继发性或伴随性疾病，感染具有机会性是此菌致病性的一个显著特点。往往在慢性阻塞性肺疾病、老年人、恶性肿瘤病人、肾透析、脏器移植时接受免疫抑制剂以及应用肾上腺皮质激素者，本病发生率增加。

(2)致病性低。一般认为NTM对人类的致病性比结核分枝杆菌低。刘敬东认为，全国感染NTM者估计在1亿以上，但发病者仅百余例。我病区同时期有9例患者使用呼吸机，其中8例患者从痰中检测到抗酸杆菌，通过结核菌培养加菌种鉴定，其中7例患者无结核复合群。这8例患者中仅1例有明确的肺部阴影。

(3)临床症状差异较大。一般认为NTM引起的肺部病变与肺结核十分相似，症状大多较轻，缺少特征性。一般表现为咳嗽、咳痰、低热和疲乏或偶有咯血，有些患者无明显临床症状和体征。因多数患者有肺部基础疾病，蓁咳嗽、咳痰的症状往往被误诊为基础疾病所致。

(4)艾滋病及HIV感染者多发。在美洲和欧洲艾滋病病人中，发现50％患者感染分枝杆菌，其中10％～15％为鸟-胞内复合群分枝杆菌。

(5)耐药率高。有报道非结核分枝杆菌的耐药率为95.9％；耐多药率为83.7％。

由于分支杆菌耐药率高，在疾病检测过程中菌种鉴定的作用尤为重要，鉴定所感染菌种可以更好的指导用药。

目前国内外的分枝杆菌菌种检测试剂盒主要存在检测范围偏小，容易漏检的缺点。

发明内容

为解决上述问题，本发明的主要目的在于提供一种可一次检测23中分枝杆菌类型，且检测时间短，结果准确可信的分枝杆菌菌种检测膜条。

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种分枝杆菌菌种检测膜条，包括一基底，和固定于所述基底上的特异性寡核苷酸探针，所述特异性寡核苷酸探针包括：

1)用于检测耻垢分枝杆菌的特异性寡核苷酸探针，其碱基序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：26-28任意一项所示；

2)用于检测胞内分枝杆菌的特异性寡核苷酸探针，其碱基序列如SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：29-31任意一项所示；