[发明专利]土壤中获得纯净线虫孢囊的方法

说明书

技术领域

本发明涉及农业土壤害虫防治领域，尤其是涉及一种土壤中获得纯净线虫孢囊的方法。

背景技术

孢囊线虫是世界农业生产中的重要线虫病害种类，其中大豆孢囊线虫、小麦禾谷孢囊线虫、马铃薯金线虫等孢囊线虫均给世界各地的农业生产造成巨大的经济损失，为了降低因孢囊线虫给农产品带来的损失，世界各国均对孢囊线虫进行了深入的研究，对孢囊线虫进行研究的前提是首先要将孢囊线虫从土壤中分离出来，从土壤中直接分离线虫孢囊是各种孢囊线虫研究的重要技术手段。

目前将线虫孢囊直接从土壤中分离的技术手段主要有利用锥形瓶的简易分离法和利用范韦克(Fenwick)漂浮器分离法，但上述方法分离的前提是首先需要将土壤风干，处理时间较长，而且需要使用特定容器，由于受分离容器体积的限制，分离土样量较小，不能够快速而大量地从土壤中直接分离线虫孢囊。

发明内容

本发明的目的是提供一种土壤中获得纯净线虫孢囊的方法，能够缩短原有方法从土壤中获得纯净线虫孢囊的时间，并可增加一次性获得纯净线虫孢囊的数量。

为实现上述目的，本发明提供了一种土壤中获得纯净线虫孢囊的方法，包括：

步骤101，在第一容器中将破碎后的含线虫孢囊的土壤与水按比例混合，搅拌后静置20-40秒，将第一容器内的上清液倒入套筛上，所述套筛包括上层网筛和底筛，将第一容器内的沉淀物按上述方法连续处理2-3次后将所述上层网筛上的残余物中的线虫孢囊用水冲洗到所述底筛上；

步骤103，将步骤101中所述底筛上的残余物用水冲洗到第二容器中，搅拌后沉淀1.5-5分钟，去除漂浮在第二容器内悬浮液表面的有机质和空、瘪线虫孢囊，然后倒掉第二容器中的上清液，按上述方法冲洗步骤101中所述底筛上的残余物2～3次；

步骤105，将所述第二容器中倒掉上清液后的沉淀物倒入套筛中，用水冲洗所述套筛的上层网筛；

步骤107，将步骤105中所述套筛的底筛上的残余物冲入漂浮液中，搅拌后静置1-2分钟，将上述漂浮液中的漂浮物即线虫孢囊倒入所述底筛上，用水冲洗干净。

因此，本发明通过采用上述从土壤中获得纯净线虫孢囊的方法，能够缩短原有方法从土壤中获得纯净线虫孢囊的时间，并可增加一次性获得纯净线虫孢囊的数量。

下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

附图说明

图1为本发明土壤中获得纯净线虫孢囊的方法实施例的流程图。

具体实施方式

实施例一

图1为本发明土壤中获得纯净线虫孢囊的方法实施例的流程图，如图1所示，包括：

步骤101，在第一容器中将破碎后的含线虫孢囊的土壤与水按比例混合，所述土壤与水的比例介于1∶5与1∶40之间，混合溶液中主要包括线虫孢囊、有机质及较大的土壤颗粒，充分搅拌后静置20-40秒，由于线虫孢囊比重比水大，因此在此步骤中我们搅拌后只静置20-40秒，此时线虫孢囊还没沉淀，存在于第一容器内的上清液中，而破碎后的土壤中的较大的土壤颗粒则会沉淀，通过对静置时间的控制，将破碎后的土壤中的较大的土壤颗粒去除，然后将第一容器内的上清液倒入套筛上，本实施例中所述套筛均包括上层网筛和底筛，不过本实施例中不同步骤中的套筛的上层网筛和底筛的目数可以不同。倒入套筛后，线虫孢囊和部分有机质会保留在所述套筛的上层网筛和底筛上，然后将第一容器内的沉淀物按上述方法连续处理2-3次，使得土壤中的线虫孢囊能够全部被冲洗到套筛上，然后再冲洗所述上层网筛，将所述上层网筛上的残余物中的线虫孢囊全部用水冲洗到所述底筛上，通过所述上层网筛将残余物中比线虫孢囊大的有机质去除，通过所述底筛将残余物中比线虫孢囊小的有机质去除，本步骤中所述第一容器为10-70L圆筒状容器，所述上层网筛介于20目和30目之间，所述底筛介于60目和80目之间。

步骤103，将步骤101中所述底筛上的残余物用水冲洗到第二容器中，此时残余物中只有大小与线虫孢囊近似的有机质，搅拌后沉淀1.5-5分钟，去除漂浮在第二容器内悬浮液表面的有机质和空、瘪线虫孢囊，本实施例中采用棉布擦拭去除漂浮在第二容器内悬浮液表面的有机质和空、瘪线虫孢囊，由于线虫孢囊比重比水大，在本步骤中的沉淀时间内将会沉淀，然后倒掉第二容器中的上清液，按上述方法冲洗步骤101中所述底筛上的残余物2～3次，使得所述底筛上的残余物能够完全转移到所述第二容器中，并将残余物中的有机质和空、瘪线虫孢囊去除，本步骤中所述第二容器为5-20L圆筒状容器。