[发明专利]具有内切葡聚糖酶/木聚糖酶活性的双功能酶及其制备方法与应用有效
申请号: | 201010208945.4 | 申请日: | 2010-06-24 |
公开(公告)号: | CN101906406A | 公开(公告)日: | 2010-12-08 |
发明(设计)人: | 吕红;常磊;周峻岗 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12P19/14 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 陆飞;盛志范 |
地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 内切葡 聚糖 活性 功能 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种具有内切葡聚糖酶/木聚糖酶活性的双功能酶,命名为RuCelA,其特征在于来源于瘤胃未培养微生物,其氨基酸序列具有如下特征:
1)SEQ ID NO.2的氨基端的第1-551或22-551位氨基酸残基序列;
2)将SEQ ID NO.2的氨基端的第1-551或第22-551位氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有内切葡聚糖酶/木聚糖酶活性的蛋白质。
2.一种权利要求1所述的具有内切葡聚糖酶/木聚糖酶活性的双功能酶的编码基因,其特征在于DNA序列具有如下特征:
1)具有SEQ ID NO.1的DNA序列;
2)编码SEQ ID NO.2蛋白质序列的DNA序列。
3.一种如权利要求1所述的具有内切葡聚糖酶/木聚糖酶活性的双功能酶的制备方法,其特征在于将含有权利要求1或2所述的内切葡聚糖酶/木聚糖酶双功能酶RuCelA编码基因克隆入重组表达载体,导入宿主细胞,获得重组表达的双功能酶RuCelA。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于所述的重组表达载体为大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、丝状真菌表达载体、昆虫表达载体或哺乳动物细胞表达载体。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于所述的重组表达基因的重组菌或转基因细胞系为大肠杆菌宿主细胞、酵母菌宿主细胞、枯草杆菌宿主细胞、乳酸菌宿主细胞、丝状真菌宿主细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞。
6.如权利要求1所述的具有内切葡聚糖酶/木聚糖酶活性的双功能酶在纤维素降解中的应用。
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