[发明专利]检测痕量环境激素的介孔碳分子印迹探测器及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及环境激素检测技术领域，更具体地说是一种检测痕量环境激素的分子印迹探测器，本发明还涉及所述的分子印迹探测器在检测环境激素中的应用。

背景技术

环境激素(Environmental hormone)是指人类在生产、生活过程中释放到环境中的某些有毒化学物质，它们与动物体内的激素具有类似的化学结构，发挥着类似激素的作用，它们进入体内，扰乱了激素的正常分泌，使动物的生理程序发生紊乱，导致生殖、免疫等功能发生障碍。

目前环境激素已经成为全球性的环境污染问题。目前已知的环境激素约有70种，广泛存在于大气、水、土壤等环境介质中。在日常生活中，含有环境激素的化合物比比皆是，如垃圾焚烧排出大量剧毒物质二恶英、农药、林木保护剂、洗涤剂、化妆品、稀释剂、塑料制品和食品中的某些添加剂、电磁波污染、汽车尾气以及含有激素的保健药品等等。如果环境激素不能得到及时、准确地检测，它们就可能进入机体，并在体内直接或间接影响正常的激素代谢，给人类健康带来严重的危害。

建立一种高灵敏度和特异性的快速筛检环境激素的方法，便成为当前该研究领域亟需解决的问题之一。目前已有的环境激素检测或筛检方法主要包括体内试验、体外试验、生物标志物检测及仪器检测方法等，但是这些检测或筛检方法存在不足：

1.体内试验常采用子宫增重试验和子宫钙结合蛋白CaBP-9k mRNA表达检测和蛋白分析，该方法反应敏感具有专一性，但是其成本高，灵敏度低，不适于大规模的快速筛检；

2.体外试验主要有E-Screen法、受体竞争试验等，试验本身的特异性较差，容易出现假阳性结果；

3.借助于HPLC或LC-MS联用技术等大型精密仪器建立起来的环境激素仪器检测方法，对环境激素的检测虽说具有很高的灵敏度，但是该方法不能一次就鉴定出分析物的结构，往往还需要用GC-MS确认结构，技术成本较高，传统方法所需的时间一般都较长，有的甚至长达几个小时，操作复杂，不能用于现场的快速检测。

4.以上几种方法对于环境激素的检测和分析，一般都存在检测灵敏度低、成本高、结果假阳性、检测过程复杂、检测单一、试剂用量大、不适于现场快速检测等缺点，因此不能满足实际检测的需要。

申请号为200810138510.X的申请文件公布了一种分子印迹膜基片，用于痕量环境内分泌干扰物，使用了纳米金、碳纳米管或纳米铂，成本较高。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供了一种试剂用量少、检测速度快、灵敏度高，并且能够高通量检测痕量环境激素的介孔碳分子印迹探测器。

本发明还提供了检测痕量环境激素的介孔碳分子印迹探测器在检测环境激素中的应用。

本发明是通过以下方式实现的。

一种检测痕量环境激素的介孔碳分子印迹探测器，其特征在于采用以下步骤制成：

(1)选择功能单体，所述功能单体能与环境激素合成分子印迹聚合物；

(2)选用环境激素分子作为模板分子，按一定摩尔比将模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂混合均匀制成分子印迹聚合物；

(3)将介孔碳制备成介孔碳溶液；

(4)利用层层修饰技术，将介孔碳溶液和分子印迹聚合物修饰到玻璃片表面；

(5)将介孔碳和分子印迹聚合物修饰的玻璃片置于微孔板内，用保鲜膜封存数小时后，得到检测痕量环境激素的介孔碳分子印迹探测器。

所述检测痕量环境激素的介孔碳分子印迹探测器，其特征还在于：所述功能单体为丙烯酸、甲基丙烯酸或4-乙烯基吡啶；所述交联剂为三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、N、N-亚甲基二丙烯酰胺、3，5-二(丙烯酰胺)苯甲酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、二乙烯基苯或季戊四醇三丙烯酸酯；所述引发剂为偶氮二异丁腈；所述致孔剂采用二氯甲烷、氯仿、乙腈、甲醇、异丙醇、四氯化碳、N，N-二甲基酰胺或二甲基亚砜；所述有机溶剂为二氯甲烷或四氯化碳。

所述检测痕量环境激素的介孔碳分子印迹探测器，其特征还在于：所述模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂的摩尔比为0.2～2∶1∶0.4～5∶35～60∶0.10～0.20∶3.0～30。

所述检测痕量环境激素的介孔碳分子印迹探测器，其特征还在于：所述将介孔碳溶液和分子印迹聚合物修饰到玻璃片表面，包括以下步骤：

(a)将所用玻璃片用NaOH溶液清洗，然后用二次蒸水清洗，干燥；

(b)向步骤(a)中处理过的玻璃片上滴加介孔碳溶液并晾干；

(c)向步骤(b)中晾干的玻璃片上滴加分子印迹聚合物，干燥，用洗脱剂洗脱，将此层中的模板分子洗掉，干燥；