[发明专利]一种用微生物发酵生产甲壳低聚糖的方法

权利要求书

1.一种用微生物发酵生产甲壳低聚糖的方法，其特征是以新鲜的虾壳或蟹壳为原料，经原料的制备、发酵原液配制、发酵原液灭菌、接种发酵、流加补料、离心去菌体、真空浓缩、喷雾干燥、产品精制，获得产品甲壳低聚糖；

(1)原料的制备：新鲜的虾壳或蟹壳晒干，粉碎成120目的干粉备用；

(2)发酵原液配制：以重量比2.5％的虾、蟹壳粉与水混合均匀，再加入0.02％蛋白胨，制成发酵原液；

(3)发酵原液灭菌：把配制好的发酵原液泵入发酵罐，密闭罐体，加入蒸汽进行灭菌，使料温升至121℃，保温30分钟，然后逐渐冷却至28℃；

(4)接种发酵：往灭菌好的发酵液中接种入5％种子罐培养好的发酵菌，搅拌通风发酵，刚接种后通风量为1：0.05v/v.min，在发酵的过程，再根据二氧化碳的产生量，逐步增加通风量，并逐步提高发酵温度，在发酵过程定期测定还原糖含量，和甲壳低聚糖的生成量；

(5)流加补料：流加料为10％虾、蟹壳粉混合悬浮液，置于流加罐中，通入蒸汽升温至121℃，保温30分钟灭菌，冷却后备用，在发酵的中后期时，分三次逐步流加入发酵罐；

(6)离心去菌体：发酵结束时需测含甲壳低聚糖含量，直接泵入离心机，在离心机5000rpm中，离心30分钟，获得上清液，把上清液泵入储罐中备用，抽样检测含甲壳低聚糖量；

(7)真空浓缩：把上清液泵入双效蒸发浓缩罐中，进行真空浓缩，浓缩至浓缩液甲壳低聚糖含量在10～15％时，泵入储罐备用；

(8)喷雾干燥：将甲壳低聚糖浓缩液，采用喷雾干燥机，通过调节进料口温度为150℃，出料口温度70～75℃，进行喷雾干燥，制得甲壳低聚糖干燥粉产品，甲壳低聚糖收率可达96％以上，水溶性好。

(9)产品精制：喷雾干燥的粉末中，还含有一定量的无机盐成分，因此甲壳低聚糖3000～4000分子量的含量纯度为93.6％。该产品作为农用、畜牧食用，纯度已完全可行，如需进一步提高含量，可通过2倍的食用乙醇进行纯化，即可获得99％含量甲壳低聚糖产品，完全水溶。

2.根据权利要求1所述的一种用微生物发酵生产甲壳低聚糖的方法，其特征是2.5％虾、蟹壳粉混合悬浮液为1.5％的虾壳粉和1％蟹壳粉与水混合与0.02蛋白胨制成发酵液，流加液是10％虾、蟹壳粉混合悬浮液为6％的虾壳粉和4％的蟹壳粉与水混合成悬浮液。

3.根据权利要求1所述的一种用微生物发酵生产甲壳低聚糖的方法，其特征是种入种子罐培养好的发酵菌，其发酵菌是为培养成熟的淡紫拟青霉菌菌种的制备：斜面保藏菌种→活化生产斜面→一级三角瓶扩培→二级三角瓶扩培→种子培养为成熟菌种，接种量为5％发酵液量。