[发明专利]一种阳离子型两亲性壳聚糖纳米药物载体及其制备和应用

权利要求书

1.一种阳离子型两亲性壳聚糖纳米药物载体，其特征在于：

它先后由脱氧胆汁酸和失水甘油三甲基氯化铵分别与壳聚糖中的氨基葡萄糖进行酰胺化反应和亲电加成反应从而制备得到由N-[(2-羟基-3-三甲基氯化铵)丙基]氨基葡萄糖单元、脱氧胆汁酸酰胺化氨基葡萄糖单元、乙酰氨基葡萄糖单元和氨基葡萄糖单元组成的水溶性好两亲性带正电的嵌段壳聚糖衍生物。

2.一种权利要求1所述药物载体的制备方法，其特征在于：在催化剂EDC和NHS的催化作用下，用生物相容性好的Mw＝15KDa-100Kda的亲水性高分子壳聚糖和亲油性小分子脱氧胆汁酸通过酰胺化反应，从而形成生物相容性好、可降解的两亲性壳聚糖衍生物CS-DCA；通过在CS-DCA的基础上进行一步通过亲电反应接枝季胺盐形小分子失水甘油三甲基氯化铵(GTMAC)，形成季胺盐形两亲性壳聚糖衍生物；在水溶液中，利用分子自组装的原理，在超声条件下制备得到粒径150-350nm且分布均匀的纳米胶束；由于该胶束特殊是表面亲水、内部亲油，因此可以实现亲油性药物如紫杉醇的包埋装载，形成纳米药物释放系统。

3.按照权利要求2所述的制备方法，其特征在于：具体操作过程如下，

1)室温下，将1-4g壳聚糖溶解于50-200mL盐酸水溶液中，随后用1-10N的NaOH将溶液pH调整到5.0-6.0，形成透明的1-2％(w/v)的壳聚糖溶液；

2)取脱氧胆汁酸，使脱氧胆汁酸的物质量与壳聚糖中氨基葡萄糖残基的物质量之比为0.10-0.30，将之加入到50-100mL的DMSO溶液中，随后向脱氧胆汁酸溶液中加入等物质量的EDC和NHS，并且保持EDC与脱氧胆汁酸的物质量之比恒定在1.0∶1-1.5∶1；脱氧胆汁酸、EDC与NHS在室温下于500-1500rpm反应30-60min；

3)将脱氧胆汁酸、EDC与NHS于DMSO中反应30-60min的混合溶液于30-60min内缓慢滴加到的壳聚糖溶液中，在500-1500rpm的搅拌速度下反应18-36h；

4)将上述反应混合溶液加入到200-500mL甲醇中，并且用NaOH溶液将pH值调节至中性使壳聚糖接枝产物沉淀，随后离心收集沉淀；

5)将上述沉淀重新溶于50-200mL pH1-5酸性的水溶液中，并且重复操作步骤中4)3-5次，但是最后一次将甲醇换为乙醇即可；将得到的白色凝胶产物于室温下真空干燥从而制备得到CS-DCA；

6)将上述产物CS-DCA取0.5-4g加入到25-200mL含有0.25-2.0mL乙酸的水溶液中并于500-1500rpm搅拌至充分混均，随后将上述混合液加热至40-60℃，并向其中滴加失水甘油基三甲基氯化铵(GTMAC)，反应18-36h；并且GTMAC与CS-DCA中氨基葡萄糖的物质量比例控制为3∶1至5∶1；

7)将上述反应液取出，并且用NaOH溶液将其pH值调节到中性，离心；将上清液置于透析袋中于清水中透析3-5天，最后将透析液冷冻干燥，得到白色棉状产物HT-CS-DCA。

4.按照权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述得到白色棉状产物HT-CS-DCA可进一步制备得到一定粒径均匀分布的纳米颗粒溶液，

具体为：取合成产物HT-CS-DCA，加入到pH＝5.0-7.8的PBS溶液中，使得HT-CS-DCA的浓度在0.5-5mg/mL，于18-40℃下低速振荡至溶解，随后用探针型超声仪于冰水浴中超声1-3min，工作时5-3s，停1-3s，重复2-4次，即可制备得到一定粒径均匀分布的纳米颗粒溶液。

5.按照权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述产物浓度为1-4mg/mL，超声的功率为40-100W。

6.一种权利要求1所述药物载体的应用，其特征在于：

1)取HT-CS-DCA溶解于水中，HT-CS-DCA的浓度为2mg/mL，在500-1500rpm搅拌的条件下并向其中滴加紫杉醇(PTX)甲醇溶液，使得甲醇溶液的体积与HT-CS-DCA溶液的体积比为1∶5-1∶20，随后将之用探针型超声仪超声10-40min，工作时5-3s，停1-3s；紫杉醇与材料HT-CS-DCA的质量为0.10∶1至0.3∶1；

2)将上述溶液置于透析袋于大量清水中透析18-36小时，随后用0.45-0.8μm滤膜过滤，并将滤液冷干燥即得到载有PTX的纳米药物载体材料。