[发明专利]EB病毒潜伏膜蛋白2B细胞表位及应用

说明书

技术领域

本发明属于生物制药及诊断领域，更具体地，本发明涉及来自于EB病毒潜伏膜蛋白2上的三个B细胞表位及其编码核酸，其制备方法及其在预防、治疗和诊断EB病毒感染及其相关疾病方面的应用。

背景技术

EB病毒(Epstein-Barr Virus，EBV)是传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis，IM)的病原，由Epstein和Barr于1964年首先从非洲Burkitt’s淋巴瘤培养细胞中发现。EBV感染普遍，约90％以上的人建立了终身潜伏感染(参见Maeda A，Sato T，Wakiguchi H.[Epidemiology of Epstein-Barr virus(EBV)infection and EBV-associated diseases][J].Nippon Rinsho，2006，64Suppl 3：609-612)，但没有明显的临床症状。EBV具有嗜B淋巴细胞的特征，能够刺激B细胞增生和转化，因而属于肿瘤原性病毒，与何杰金病、Burkitt’s淋巴瘤以及中国南方高发的鼻咽癌(Nasopharyngenl Carcinoma，NPC)等肿瘤密切相关，近来报道尚与宫颈癌(Sasagawa T等，Epstein-Barr virus(EBV)genes expression in cervical intraepithelial neoplasia and invasive cervical cancer：a comparative study with human papillomavirus(HPV)infection[J].Hum Pathol，2000，31(3)：318-326)、胃癌(Sairenji T.Epstein-Barr virus(EBV)infection and gastric carcinoma：the approach through EBV infected epithelial cell lines[J].Jpn J Infect Dis，1999，52(3)：110-112)、肺癌(Verschuuren E等，Quantitative Epstein-Barr virus(EBV)serology in lung transplant recipients with primary EBV infection and/or post-transplant lymphoproliferative disease[J].J Med Virol，2003，69(2)：258-266)和乳腺癌(Yasui Y等，Breast cancer risk and″delayed″primary Epstein-Barr virus infection[J].Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2001，10(1)：9-16)相关。其中EBV与NPC的关系研究较为深入。据估计全世界鼻咽癌病例中80％发生于中国，血清学普查及分子流行病学研究表明，几乎100％未分化和低分化NPC患者可在血清中检测到特异性的EBV抗体，并在鼻咽癌组织中检测到EB病毒的基因组及其表达产物(Davis JE等，Determining virological，serological and immunological parameters of EBV infection in the development of PTLD[J].Int Immunol，2004，16(7)：983-989)。目前，早期鼻咽癌的5年生存率平均在50％左右，而中晚期者仅为20％～30％。EBV引起的感染及其相关肿瘤已对人类健康构成了极大危害，因而寻求有效的疫苗是防治其感染及其相关肿瘤的主要途径。

EBV主要有2种感染方式：潜伏感染和裂解性感染。潜伏感染时主要表达8种蛋白(6种核蛋白EBNA1、EBNA2、EBNA3A、EBNA3B、EBNA3C、EBNALP和2种膜蛋白LMP1与LMP2)，其作用主要是维持病毒处于潜伏感染状态，并且促使原来处于静止状态的B淋巴细胞维持增生。研究表明，LMP1为肿瘤原性蛋白，而LMP2则不具细胞转化作用。LMP2由LMP2A和LMP2B组成，可通过脂质筏和src家族的syk、lyn蛋白酪氨酸激酶的调节作用来阻止由BCR引起的酪氨酸磷酸化，阻止EBV进入病毒增殖期，从而维持EBV潜伏感染，且在霍奇金病和鼻咽癌等肿瘤组织中持续表达。因此，LMP2是研究防治EBV感染及其相关肿瘤的理想靶抗原之一，其中的B细胞表位，在诱导机体产生特异性的体液免疫方面具有非常重要的意义。