[发明专利]水酶法提取花生四烯酸油脂的工艺

权利要求书

1.一种水酶法提取花生四烯酸油脂的工艺，其特征在于，该工艺包含如下步骤：

(1)培养高山被孢霉发酵生产花生四烯酸；

(2)向步骤(1)得到的发酵液中，加蒸馏水稀释1～3体积倍数制成菌体悬浮液，加入0.25～2.5g/L的生物酶，调节体系pH值至生物酶的酶解反应最适pH，调节体系温度至生物酶的酶解反应最适温度，进行酶解6～10h；

(3)向步骤(2)得到的酶解后的体系中，加入体系体积的10～15％(v/v)的乙醇和20～40％(v/v)的正己烷进行油脂萃取，离心分层，取有机相；向剩下的水相和固体相中，加入步骤(2)得到的酶解后体系体积的20～40％(v/v)的正己烷进行二次萃取，离心分层，取有机相，合并两次有机相；

(4)旋转蒸发收集的有机相，得到花生四烯酸油脂。

2.根据权利要求1所述的水酶法提取花生四烯酸油脂的工艺，其特征在于，所述的生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶、糖化酶、淀粉酶、蜗牛酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶中的任意一种或几种。

3.根据权利要求1或2所述的水酶法提取花生四烯酸油脂的工艺，其特征在于当所加入的生物酶为单一酶时，各种酶的酶解条件如下：

纤维素酶，最适pH为4.5～5.5，最适温度为40～50℃；

木聚糖酶，最适pH为3.5～5.5，最适温度为50～60℃；

果胶酶，最适pH为3.5～4.5，最适温度为50～60℃；

糖化酶，最适pH为4.0～4.5，最适温度为60～62℃；

淀粉酶，最适pH为5.5～6.5，最适温度为50～55℃；

蜗牛酶，最适pH为5.8～7.2，最适温度为37～45℃；

木瓜蛋白酶，最适pH为5.5～6.0，最适温度为45～65℃；

碱性蛋白酶，最适pH为7.5～9.0，最适温度为45～60℃；

中性蛋白酶，最适pH为6.5～7.5，最适温度为45～60℃。

4.根据权利要求1或2所述的水酶法提取花生四烯酸油脂的工艺，其特征在于当所加入的生物酶为多种酶时，采用依次向菌体悬浮液中加入单一酶进行酶解的方式，每一种酶都在其最适pH条件和最适反应温度下进行酶解，一种酶的反应结束之后，再加入另外一种酶。