[发明专利]毛红椿酸甲酯及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，更具体而言，涉及一种从中国毛红椿(Toona ciliata var.pubescens)中提取分离得到骨架新颖的三萜类化合物毛红椿酸，然后通过重氮甲烷甲基化得到的化合物毛红椿酸甲酯(Methyl toonapubesate A)。本发明还涉及该化合物的制备方法。生物活性测试显示：该化合物为对Aβ或H₂O₂损伤的SH-SY5Y细胞具有保护作用的活性成分，从而它可用于制备治疗早老性痴呆的药物。

背景技术

毛红椿为楝科香椿属植物，广泛分布在江西、湖北、湖南、广东、贵州和云南等省；生于低海拔和中海拔的山地密林或疏林中。

早老性痴呆症与神经损伤有重要的相关性，作为拟神经细胞模型，SH-SY5Y细胞系广泛应用于早老性痴呆症的发病机制和新药开发的研究中。

发明内容

本发明是从中国毛红椿中提取分离得到骨架新颖的三萜类化合物毛红椿酸，然后通过重氮甲烷甲基化得到化合物毛红椿酸甲酯。经药理试验研究表明，该化合物对Aβ或H₂O₂损伤的SH-SY5Y细胞具有显著的保护作用，进而可用于制备治疗早老性痴呆症的药物。

因此，本发明的一个目的是提供新的三萜类化合物毛红椿酸甲酯。

本发明的另一目的是提供所述毛红椿酸甲酯的制备方法。

本发明的进一步目的是提供所述毛红椿酸甲酯在制备保护神经细胞(例如，经Aβ(β-淀粉样蛋白)或H₂O₂损伤的SH-SY5Y细胞)的药物或制备抗早老性痴呆症的药物方面的用途。

根据本发明的第一个目的，本发明首次从毛红椿中发现了一个具有新骨架的毛红椿酸衍生物毛红椿酸甲酯，其化学结构如下所示：

根据本发明的第二个目的，本发明提供了毛红椿酸甲酯的制备方法，它是从毛红椿T.ciliata var.pubescens中提取分离得到骨架新颖的三萜类化合物毛红椿酸，然后通过重氮甲烷甲基化得到化合物毛红椿酸甲酯，具体步骤如下：

提取：将中国毛红椿树皮用甲醇提取，所得提取液浓缩后得粗浸膏；将该粗浸膏溶于水，混悬均匀后依次用氯仿和正丁醇萃取，所得萃取液浓缩后分别得到氯仿浸膏和正丁醇浸膏；

分离：氯仿浸膏进行硅胶柱层析，以石油醚/乙醚梯度洗脱；其中，石油醚/乙醚体积比50∶50洗脱部分，经Sephadex LH-20凝胶柱层析，以氯仿/甲醇体积比1∶1洗脱，得到毛红椿酸；

甲基化：将毛红椿酸通过重氮甲烷甲基化得到毛红椿酸甲酯。

在上述制备方法中，在提取步骤中，所述提取采用的方法为甲醇渗漉提取。

在上述制备方法中，在分离步骤中，石油醚/乙醚梯度洗脱的浓度依次为体积比80∶20、70∶30、60∶40和50∶50。

在上述制备方法中，在甲基化步骤中，所述甲基化具体为将毛红椿酸溶解在氯仿中，加入重氮甲烷进行。

根据本发明的第三个目的，本发明提供了毛红椿酸甲酯的用途。

本发明采用MTT法测试了毛红椿酸甲酯拮抗Aβ或H₂O₂引起的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞存活率下降的活性。实验证实，毛红椿酸甲酯对上述模型中的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用。

因此本发明的毛红椿酸甲酯可用作制备保护神经细胞(例如，经Aβ或H₂O₂损伤的SH-SY5Y细胞)的药物，进而可用作制备治疗早老性痴呆症(Alzheimer’s disease，AD)的药物。

此外，本发明毛红椿酸甲酯可以与药学上可接受的载体、赋形剂或辅料组合，可进一步研究开发成治疗早老性痴呆症的先导化合物或药物组合物。

本发明的毛红椿酸甲酯可通过从植物中提取分离得到毛红椿酸后，经过重氮甲烷甲基化得到；也可以经本领域技术人员熟知的化学修饰方法合成获得。

附图说明

图1A和图1B分别为毛红椿酸甲酯在不同浓度下对Aβ和H₂O₂诱发的SH-SY5Y细胞损伤的细胞存活率柱状图。

具体实施方式

在如下的实施例中所指的毛红椿酸甲酯的化学结构式(结构式中的阿拉伯数字是化学结构中碳原子的标位)：

实施例1毛红椿酸甲酯的制备