[发明专利]一种体外检测标记物及其制备方法以及其所制成的试纸条无效
申请号: | 201010220177.4 | 申请日: | 2010-06-28 |
公开(公告)号: | CN101893622A | 公开(公告)日: | 2010-11-24 |
发明(设计)人: | 李纪阳 | 申请(专利权)人: | 北京海瑞祥天生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/532 | 分类号: | G01N33/532 |
代理公司: | 北京方韬法业专利代理事务所 11303 | 代理人: | 遆俊臣 |
地址: | 100195 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 体外 检测 标记 及其 制备 方法 制成 试纸 | ||
1.一种体外检测标记物的制备方法,其特征在于主要包括以下步骤:
A.将抗体溶于去离子水中,使其浓度达到1mM;
B.将直径0.3-0.5um的聚苯乙烯微球储存液震荡后,取出2ul微球溶液离心;
C.除去上清后加缓冲液,并震荡;
D.将步骤A的产物1∶10稀释,并取2ul置于步骤C的离心管中;
E.加入2.5ul 10mg/ml的EDC,并在震荡混合均匀后孵育;
F.加入表面活性剂并离心;
G.除去上清,将沉淀溶于缓冲液,震荡、显微镜计数、保存。
2.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的离心使用Eppendorf离心管,条件为8000g-10000g转速离心1-2min。
3.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤C中加入的缓冲液为50ul 100mM的MES,并控制pH值为4.5。
4.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的震荡均为剧烈震荡20s。
5.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤E孵育条件为室温暗室孵育30min。
6.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤F包括:
先加入1.0ml 0.02%的表面活性剂Tween-20并离心;
再除去上清,加入1.0ml 0.1%的阴离子表面活性剂SDS、振荡、离心。
7.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤F包括:
先加入1.0ml 0.1%的阴离子表面活性剂SDS、振荡、离心;
再除去上清,加入1.0ml 0.02%的表面活性剂Tween-20并离心。
8.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤G的缓冲液为100mM pH值为8.0的Tris溶液,保存条件为4℃。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法制成的体外检测标记物。
10.根据权利要求9所述的体外检测标记物制成的试纸条,其特征在于包括底板,以及依次固定在底板上的样品垫、标记区、NC膜和吸水滤纸,其中,标记区分布有权利要求9所述的体外检测标记物。
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