[发明专利]一种体外检测标记物及其制备方法以及其所制成的试纸条无效

专利信息
申请号: 201010220177.4 申请日: 2010-06-28
公开(公告)号: CN101893622A 公开(公告)日: 2010-11-24
发明(设计)人: 李纪阳 申请(专利权)人: 北京海瑞祥天生物科技有限公司
主分类号: G01N33/532 分类号: G01N33/532
代理公司: 北京方韬法业专利代理事务所 11303 代理人: 遆俊臣
地址: 100195 北京*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 体外 检测 标记 及其 制备 方法 制成 试纸
【权利要求书】:

1.一种体外检测标记物的制备方法,其特征在于主要包括以下步骤:

A.将抗体溶于去离子水中,使其浓度达到1mM;

B.将直径0.3-0.5um的聚苯乙烯微球储存液震荡后,取出2ul微球溶液离心;

C.除去上清后加缓冲液,并震荡;

D.将步骤A的产物1∶10稀释,并取2ul置于步骤C的离心管中;

E.加入2.5ul 10mg/ml的EDC,并在震荡混合均匀后孵育;

F.加入表面活性剂并离心;

G.除去上清,将沉淀溶于缓冲液,震荡、显微镜计数、保存。

2.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的离心使用Eppendorf离心管,条件为8000g-10000g转速离心1-2min。

3.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤C中加入的缓冲液为50ul 100mM的MES,并控制pH值为4.5。

4.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的震荡均为剧烈震荡20s。

5.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤E孵育条件为室温暗室孵育30min。

6.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤F包括:

先加入1.0ml 0.02%的表面活性剂Tween-20并离心;

再除去上清,加入1.0ml 0.1%的阴离子表面活性剂SDS、振荡、离心。

7.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤F包括:

先加入1.0ml 0.1%的阴离子表面活性剂SDS、振荡、离心;

再除去上清,加入1.0ml 0.02%的表面活性剂Tween-20并离心。

8.根据权利要求1所述的体外检测标记物的制备方法,其特征在于所述的步骤G的缓冲液为100mM pH值为8.0的Tris溶液,保存条件为4℃。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法制成的体外检测标记物。

10.根据权利要求9所述的体外检测标记物制成的试纸条,其特征在于包括底板,以及依次固定在底板上的样品垫、标记区、NC膜和吸水滤纸,其中,标记区分布有权利要求9所述的体外检测标记物。

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