[发明专利]用于防除连作烟草青枯病的拮抗菌NJL-14

说明书

本申请为分案申请，原申请为，发明名称：防除连作烟草青枯病的拮抗菌及用其微生物有机肥料，申请号：200910183359.6。

一、技术领域

本发明涉及能防除连作烟草青枯病的拮抗菌及用其制成的微生物有机肥料，属于农业集约化生产技术领域，专用于克服和消除连作烟草青枯病问题。

二、背景技术

烟草是我国主要的经济作物，其质量的优劣关系着国计民生。烟草青枯病是烟草的主要病害之一，危害严重，谓之“烟癌”。1880年首次发现于美国，目前，在我国西南烟区普遍发生，在疫区常呈暴发流行，造成毁灭性损失，发病严重时产量损失80％左右。烟草青枯病是一种发病严重的土传性细菌性病害，该病广泛分布于全世界的热带、亚热带和一些温暖的地区。在中国，此病在河南、山东、江苏、云南、广西、河北、湖南、广东、福建等地普遍发生，成为影响我国烟草产量及质量的罪魁祸首之一。烟草青枯病致病菌(Ralstonia solanacearum)能通过土壤、流水(灌溉等)、种子等方式传播，对环境有很强的适应能力。青枯菌侵染土壤初期，由于病原菌数量少，植株表现为生长受限，矮小，畸形，易感病，农民往往认为是养分问题而加大氮肥投入，导致土壤中微生物群落进一步失衡，病原菌在根际占据优势地位，烟草青枯病发生。在高温高湿的条件下，病害发展迅速，发病严重的田块发病率达100％，造成绝收。

另一方面，水稻、小麦、玉米、油菜等作物秸秆就地焚烧、规模化养殖后的畜禽粪便随地弃置等不仅严重污染了环境，也极大地浪费了能作为有机肥和生物有机肥产品的原料；大量的养分资源(C、N、P、K、S及微量元素)流失于土壤-植物系统之外，明显地削弱了我国农业可持续发展的能力。如何将从土壤中因收获作物取走的营养元素最大限度地归还到土壤中去，唯一的途径就是将这些固体有机废弃物制成商品有机肥，再施入土壤。如果将这些固体有机废弃物经过高温发酵合成高品位的有机堆肥，再用于功能菌的载体，所制成的微生物有机肥料功能明确，将会有很好的应用前景。

三、发明内容

1.技术问题

本发明的目的在于研制一种能防除烟草青枯病的拮抗微生物有机肥料，防治效率达到80％以上，使大量的连作障碍土壤得到生物修复，确保集约化农业的顺利发展。

2.技术方案

用于防除连作烟草青枯病的拮抗菌，包括菌株NJL-25和菌株NJL-14，其中，

菌株NJL-25属于短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)，2009年7月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.3175，主要生物学特性为：革兰氏染色阳性G⁺，细胞形状为杆状，在膨大孢囊内含椭圆形芽孢，菌落平滑，严格好氧生长，接触酶阴性、V.P.反应阴性，甲基红试验阴性，发酵蔗糖、果糖、甘露醇、山梨醇等产酸不产气，硝酸还原酶阴性，淀粉水解阴性，明胶水解阳性，分解酪蛋白阳性，不产生硫化氢，产生吲哚，最适生长温度30℃，最适pH为7.0；

菌株NJL-14属于蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)，2009年7月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.3174，主要生物学特性为：革兰氏染色阳性G⁺，细胞形状为杆状，孢囊无明显膨大，芽孢圆形或柱形，中生或近中生。表面粗糙，扁平，不规则，兼性好氧生长，接触酶阳性、V.P.反应阳性，甲基红试验阳性，发酵葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、山梨醇等产酸不产气，硝酸还原酶阳性，淀粉水解阳性，明胶水解阳性，分解酪蛋白阳性，不产生硫化氢和吲哚，最适生长温度30℃，最适pH为7.0。

用上述拮抗菌所生产的防除连作烟草青枯病的微生物有机肥料，其特征在于：该肥料中分别含有1×10¹⁰个/g以上的拮抗菌NJL-25和NJL-14、全氮质量比含量为4～5％，全氮中质量比90％以上为有机氮，总氮磷钾养分质量比为6～10％、有机质质量比含量为30～35％。

所述防除连作烟草青枯病的微生物有机肥料的生产方法，包括：