[发明专利]一种减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法无效
申请号: | 201010223763.4 | 申请日: | 2010-07-12 |
公开(公告)号: | CN101892192A | 公开(公告)日: | 2010-11-24 |
发明(设计)人: | 韩之海;王涛 | 申请(专利权)人: | 北京汉氏联合生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0735 | 分类号: | C12N5/0735;C12N5/074;C12N5/0775 |
代理公司: | 天津才智专利商标代理有限公司 12108 | 代理人: | 王晓红 |
地址: | 100176 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 减少 细胞 产品 中异源 蛋白 残留 细胞培养 方法 | ||
1.一种减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,包括以下步骤:将细胞接种到含血清培养基的培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中进行培养,在细胞进入对数增长期时,将含血清培养基更换为无血清培养基。
2.根据权利要求1所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述细胞培养方法为贴壁培养。
3.根据权利要求1所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述细胞为在培养时具有贴壁特性的细胞。
4.根据权利要求1所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述细胞经过传代培养后,再将含血清培养基更换为无血清培养基。
5.根据权利要求1、2、3或4所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述细胞为干细胞。
6.根据权利要求5所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述干细胞为人干细胞。
7.根据权利要求5所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述干细胞为亚全能干细胞。
8.根据权利要求6所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述干细胞为人间充质干细胞。
9.根据权利要求8所述的细胞培养方法,其特征在于,所述干细胞为从体外脐带胎盘来源的人间充质干细胞。
10.根据权利要求1所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述含血清培养基为DMEM/F12、DMEM、MCDB-201或M199中的一种或几种的组合,其中含体积比2%~20%的血清。
11.根据权利要求10所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述血清为牛血清或马血清。
12.根据权利要求10所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述培养基中还加入有细胞因子。
13.根据权利要求12所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述细胞因子为EGF、bFGF或VEGF中的一种或几种组合。
14.根据权利要求13所述的细胞培养方法,其特征在于,所述EGF、bFGF或VEGF的含量均为1~100ng/ml。
15.根据权利要求1所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述二氧化碳培养的条件为37℃、饱和湿度、二氧化碳浓度5%,氧浓度为1%~20%。
16.根据权利要求1所述的减少细胞产品中异源蛋白残留量的细胞培养方法,其特征在于,所述细胞接种于培养瓶时的密度为(0.1~2)×104/cm2。
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