[发明专利]一种药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法

权利要求书

1.一种药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法，其特征是具体措施如下：

A、取北五味子种子进行消毒杀菌预处理，将完整成熟胚剥离出来接种到附加生长调节剂，质量体积比为3％蔗糖和0.7％琼脂的MS培养基上，在培养温度为23±1℃，相对湿度70％，暗培养6～10周，进行愈伤组织的诱导；

B、将愈伤组织转入到附加生长调节剂，质量体积比为3％蔗糖和0.7％琼脂的1/2MS培养基上，在培养温度23±1℃，光周期为16小时光照/8小时黑暗的条件下培养25～40天，进行胚性愈伤组织和胚状体的诱导；

C、将子叶期的体细胞胚分离出来，在与第B步相同的培养基上继代培养四周，得到再生植株；

D、将再生植株进行炼苗，然后移栽，即得北五味子苗。

2.根据权利要求1所述的药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法，其特征是：步骤A中的生长调节剂选用下述中的一种：0.5～11mg/L的2，4-D、0.1～2.0mg/L的TDZ。

3.根据权利要求1所述的药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法，其特征是：步骤B中的生长调节剂选用下述中的一种或两种：0～2.0mg/L 2，4-D、0.1～2.0mg/L TDZ、0.1～0.3mg/L ZT。

4.根据权利要求1所述的药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法，其特征是：步骤A中的北五味子种子进行消毒杀菌预处理是将北五味子种子用流水冲洗四小时，放入浓度为70％酒精中表面消毒30s，再放入0.1％升汞溶液中消毒8min，然后用无菌水冲洗4～6遍。

5.根据权利要求2所述的药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法，其特征是：步骤A中生长调节剂选用2.0mg/L的2，4-D。

6.根据权利要求2所述的药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法，其特征是：步骤A中生长调节剂选用1.0mg/L的TDZ。

7.根据权利要求3所述的药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法，其特征是：步骤B中的生长调节剂选用2.0mg/L的2，4-D和0.2mg/L ZT。

8.根据权利要求3所述的药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法，其特征是：步骤B中的生长调节剂选用1.0mg/L的TDZ和0.2mg/L ZT。

9.根据权利要求1所述的药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法，其特征是：在步骤D中，在移栽时，将长有三四片叶小苗的根在流水下冲洗，去掉培养基；然后转移至含有灭过菌的珍珠岩和草炭的小容器中，珍珠岩和草炭的重量比1∶3，浇水保湿直至长出新叶。