[发明专利]从莜麦中提取α-淀粉酶抑制剂的方法无效
| 申请号： | 201010224386.6 | 申请日： | 2010-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN101891810A | 公开（公告）日： | 2010-11-24 |
| 发明（设计）人： | 石亚伟;闫永飞;钮利喜 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C07K14/415 | 分类号： | C07K14/415;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/16 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人： | 杨耀田 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 莜麦 提取 淀粉酶 抑制剂 方法 | ||
1.一种从莜麦中提取α-淀粉酶抑制剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将莜麦种子磨碎，按每100g莜麦300-600mL丙酮的量，将莜麦粉加入丙酮中，室温放置10小时以上，用真空减压泵抽干成丙酮粉；
(2)配制含100mM NaCl的20mM Tris-HCl pH8.0的缓冲液，用每100ml缓冲液溶解10-20g丙酮粉，在高速离心机上离心30min以上，保留上清液；
(3)在上清液中加入硫酸铵，收集30％-80％硫酸铵沉淀；
(4)悬浮沉淀，用20mM Tris-HCl pH8.0缓冲液透析除盐，得到蛋白溶液；
(5)将蛋白溶液，在高速离心机上离心30min以上，取上清液上样于经20mM Tris-HClpH8.0缓冲液平衡的阴离子型柱上，收集穿透蛋白溶液；
(6)将穿透蛋白溶液上样到经20mM Tris-HCl pH8.0缓冲液平衡的阳离子型柱上，进行NaCl浓度梯度洗脱，收集50mM NaCl盐浓度下的洗脱蛋白溶液；
(7)将洗脱蛋白溶液上样到经20mM Tris-HCl100mM NaCl pH8.0缓冲液平衡的凝胶层析柱上，用20mM Tris-HCl100mM NaCl pH8.0缓冲液洗脱，收集活性洗脱峰，脱盐，冷冻干燥，获得冻干粉。
2.根据权利要求书1所述的一种从莜麦中提取α-淀粉酶抑制剂的方法，其特征在于，所述的阴离子型柱是Q-Sepharose。
3.根据权利要求书1所述的一种从莜麦中提取α-淀粉酶抑制剂的方法，其特征在于，所述的阳离子型柱是Herparin-Sepharose。
4.根据权利要求书1所述的一种从莜麦中提取α-淀粉酶抑制剂的方法，其特征在于，所述的凝胶层析柱是Sephacryl凝胶层析柱。
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