[发明专利]20(S)-人参皂苷Rh2的合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有生物活性的稀有人参皂苷的合成方法，具体地说是：20(S)-人参皂苷Rh2，即即20(S)-原人参二醇-3-O-β-D葡萄吡喃糖苷，其结构如下所示的合成方法。

背景技术

人参在祖国医学中应用广泛，历史悠久，神农本草经列为上品。现代药理学研究发现，人参的主要活性成分为人参皂苷。最新药理学研究表明，人参皂苷对于细胞凋亡的保护、逆转白血病细胞耐药、抗疲劳、延缓衰老、调节中枢神经系统、提高机体免疫力、改善心脑血管供血不足、抑制肿瘤细胞生长等具有很好的作用，目前已分离并鉴定的人参皂苷达60余种，各种皂苷的含量、存在部位不尽相同，且药理作用有的相似、有的相反，有的具有独特的药理作用。自从1985年日本的Odashima报道了人参皂苷Rh2对黑色素瘤B16细胞具有诱导分化作用后，引起了各国科学家的兴趣。后续的研究证明人参皂苷Rh2还具有抑制肿瘤细胞增殖(Ota T等Cancer Le，tt.1 10(1-2)，193，1996)和促进肿瘤细胞凋亡的作用。KIM Y S等人发现人参皂苷Rh2和Rh3可以诱导不同的HL-60细胞，使之成为形态学上的和功能上的粒细胞。为了充分发挥各单体的生物活性，需进一步对各单体进行制备，才能应用于新药开发领域。

有关20(S)人参皂苷Rh2文献报道的制备方法，主要有以下儿种：

(1)酶解法。(中国专利：CN1105781C；金东史等，大连轻工业学院学报，2001，20(2)：99-104)。

采用葡萄糖苷酶对于人参属的所有种类参的人参皂苷进行水解处理，糖苷键断裂，从而得到Rh2。这种方法所需的皂苷糖苷酶的培养时间较长，水解后得到的是混合皂苷，故Rh2的得率不高，此方法的成本较高。

(2)碱水解法。(中国专利：CN1091448C，2002)

将原人参二醇类皂苷的水溶液或醇溶液，与强碱混合，于高温、高压下反应，后用醇萃取，再经硅胶柱层析纯化，收集产物并重结晶，得到20(S)-人参皂苷Rh2。这种方法起始原料需要原人参二醇组皂苷，且反应需要在高温高压下进行，条件比较苛刻，运行成本较高，且产物20(S)-人参皂苷Rh2得率不高。

(3)酸水解法。

韩国人参烟草研究所公开了从人参成分中制备20(R&S)-人参皂苷Rh2的方法，其特征在于首先得到原人参二醇皂苷组分，再经酸水解处理得20(R&S)-人参皂苷Rg3，然后继续将人参皂苷Rg3水解得人参皂苷Rh2。该方法的初始原料也是原人参二醇组皂苷，反应步骤繁琐，原料损失较大，从而导致成本增加，难以提高产率，水解后得到的是(R&S)构型的混合皂苷。

(4)以原人参二醇作为原料半合成法。

日本专利：特丌平8-208688，1996。该方法线性合成路线为六步，且在糖苷化反应中使用了等当量的碳酸银作为催化剂，价格贵重，使得该方法成本较高，且该催化剂的反应产物立体选择性不好。故从成本和收率两方面来考虑，均不利于大规模生产。

韩国人参烟草研究所公开了用强碱的醇溶液水解人参叶和根的干燥粉末，得到20(S)-人参皂苷苷元，然后再在碳酸银等催化剂存在下与葡萄糖缩合以制备20(S)-人参皂苷Rh2。该方法也是使用了碳酸银作为催化剂，价格贵重，使该方法成本较高，且使用碳酸银做催化剂的反应产物为Q、B两种糖苷键构型的混合物。

另有Atopkina，L.N.，et al，CHNCA8，Chem.Nat.Compd.(Engl.Transl.)，1986，22(3)，279-288报导，原人参二醇和乙酰溴代葡萄糖在氧化银的作用下制备20(S)-人参皂苷Rh2。该方法由于原人参二醇的12位及20位的羟基都未被保护，则很容易被葡萄糖基单取代和多取代，造成目标产物20(S)-人参皂苷Rh2难以分离，得率很低。

中国专利20041005329.2报道，以原人参二醇为原料，对其12位羟基进行保护，使用价格不菲的路易斯酸催化剂如氟代烃基磺酸、硅基氟代烃磺酸酯、氟代烃基磺酸银或不稳定的三氟化硼-乙醚络合物等做为糖苷化反应的催化剂，且反应需控制低温，成本相对较高。

20(S)-人参皂苷Rh2的合成，关键的步骤在于糖苷化反应。以上报道的制备方法在反应条件、收率、成本或反应产物的立体选择性方面都有着这样或那样的缺陷，大都不适宜于工业化生产。