[发明专利]5,7,4’-三羟基8-甲氧基-3-O-α-L-鼠李糖苷及其活性组合物的制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及新化合物5，7，4’-三羟基8-甲氧基-3-O-α-L-鼠李糖苷及其活性组合物的制备方法和在抗炎药物、保健品、功能食品中的开发和应用。 

背景技术

大叶钓樟(Lindera umbellata Thunb.)又名土官桂、干檀木、绿叶甘橿、小叶甘檀、钓樟，为樟科药用植物，以其根入药。主产于我国宁夏、陕西、甘肃、山西、河南及长江中下游。民间用其主治吐泻，寒性胃痛，腹痛，跌打损伤，风湿性关节痛，湿疹，疥癣等。有关其现代化学成分和药理活性研究多为日本研究者报道，我国尚未对这一传统药材进行深入系统的研究，我们前期研究中发现，这一植物提取物具有较好的抗炎和抗氧化活性。以活性指导分离制备得到了新化合物5，7，4’-三羟基8-甲氧基-3-O-α-L-鼠李糖苷及其活性组合物。这一研究成果在我国还处于空白状态，本领域人员也都在致力于此方面的研究，为传统中草药的物质作用基础提供了科学依据。 

发明内容

本发明的目的是提供新化合物5，7，4’-三羟基8-甲氧基-3-O-α-L-鼠李糖苷、制备方法及其在抗炎药物、保健品、功能食品中的开发和应用。 

本发明的另一个目的是提供包含5，7，4’-三羟基8-甲氧基-3-O-α-L-鼠李糖苷的活性组合物及其制备方法，该组合物具有抗炎、抗氧化和清除自由基活性。 

本发明的5，7，4’-三羟基8-甲氧基-3-O-α-L-鼠李糖苷具有如下结构： 

其是通过如下方法制备得到的： 

(1)大叶钓樟药材充分干燥后粉碎，经溶剂提取法，采用50％-100％的乙醇或甲醇浸泡后回流提取，提取2-3次，合并提取液，减压回收提取液至醇浓度低于5％，所含生药浓度20-40g/mL； 

(2)步骤(1)中所得提取液经正己烷、石油醚或环己烷脱脂，脱脂后的提取液挥干残余的有机溶剂； 

(3)步骤(2)中所得脱脂后提取液经非极性大孔树脂柱色谱处理，依次用水和甲醇或乙醇梯度洗脱，得到60％-90％醇洗脱部位，减压回收溶剂； 

(4)步骤(3)所得醇洗物混悬于水溶液中，经体积比1∶2～2∶1的乙酸乙酯萃取，回收溶剂得乙酸乙酯萃取物； 

(5)上述步骤(4)中所得乙酸乙酯萃取物经硅胶柱色谱法分离，以氯仿、甲醇或氯仿、甲醇、水混合溶剂梯度洗脱； 

(6)上述步骤(5)中所得流分经ODS柱色谱处理，以甲醇/水或乙腈/水为流动相洗脱得到洗脱流分； 

(7)上述步骤(6)中所得流分经半制备或制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水，乙腈/水或甲醇/乙腈/水为流动相洗脱，得到目标新化合物。 

如上制备方法中，步骤(2)中所用的脱脂溶剂为环己烷、正己烷或石油醚(30-60℃或60-90℃)，脱脂溶剂与提取液的体积比为1∶2～2∶1。 

步骤(3)为(2)所得脱脂后提取液经非极性大孔树脂柱色谱处理，树脂型号包括HPD100，HPD400，HPD600，D101，AB-8等通用性非极性树脂，洗脱剂为60％-90％的甲醇或乙醇。 

步骤(4)为(3)所得醇洗脱物混悬于水溶液后(500～1000ml/1kg原植物)，经乙酸乙酯萃取，回收溶剂得乙酸乙酯萃取物，萃取溶剂与水溶液体积比1∶2～2∶1。 

步骤(5)为(4)所得乙酸乙酯萃取物经硅胶柱色谱法分离，洗脱溶剂为不同比例的氯仿/甲醇(20∶1～2∶1)，氯仿/甲醇/水(20∶1∶1～7∶3∶1)。氯仿/甲醇混合比例为9∶1～7∶1的流分含有目标化合物，氯仿/甲醇/水混合比例为12∶3∶1～10∶3∶1的流分含有目标化合物。 

步骤(6)为(5)所得流分经ODS柱色谱处理，洗脱溶剂为甲醇/水或乙腈/水。甲醇/水混合溶剂比例为1∶9～7∶3、乙腈/水混合溶剂比例为1∶15～4∶3。甲醇/水混合溶剂比例为4∶6～6∶4、乙腈/水混合溶剂比例为2∶8～4∶6的洗脱流分中含有目标化合物。 

步骤(7)为(6)所得流分经半制备或制备型HPLC进一步分离，流动相为甲醇/水或乙腈/水，从甲醇/水混合溶剂比例为4∶6～6∶4、乙腈/水混合溶剂比例为2∶8～4∶6流分中分离得到目标新化合物。 

上述步骤(4)中所得乙酸乙酯萃取物经脱色树脂处理，以甲醇或乙醇为洗脱剂洗脱，所得洗脱物为包含5，7，4’-三羟基8-甲氧基-3-O-α-L-鼠李糖苷的活性组合物。即步骤(4)所得乙酸乙酯萃取物经脱色树脂(LSA-700B，LXD-762、D900等通用型号)处理得其活性组合物。