[发明专利]蓝莓组培微繁育苗方法

说明书

技术领域

本发明涉及蓝莓繁殖方法，具体涉及的是蓝莓组培微繁育苗方法。

背景技术

蓝莓属于杜鹃花科越橘属灌木，为一种小浆果果树，其果实具有很高的营养价值和经济价值。目前市场对蓝莓的需求量不断增长，但是我国蓝莓的种植业刚刚起步，各地在建立种植园时急需大量优良品种苗木。采用常规的硬枝、绿枝扦插成活率低，速度慢，无法满足市场对蓝莓苗木数量日益增长的需要。利用组织培养技术快速繁殖蓝莓苗木是最有效的一条途径。组培微繁生产的苗木质量好，均匀一致，容易脱去病毒，根系发达，将为后期树体生长结果奠定良好的基础。

众所周知，植物细胞具有全能性，在离体和人工控制条件下，可以进行不断的无性繁殖。在无菌条件下将蓝莓新梢茎尖或茎段接种到WPM附加玉米素等植物激素的培养基上，人工控制温度、光照等到条件，使其不断地增殖生长，可达到大量生产苗木的目的。通常使用的增殖激素和生长调节剂有：玉米素(ZT)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、2-异戊烯腺嘌呤(2ip)等，它们的活性比较低，组培繁殖应用时蓝莓的繁殖速度较低(通常为5倍左右)王大平不同因素对兔眼蓝莓离体培养芽诱导效果的影响[J].安徽农业科学，200937(15)；段祖安等越桔品种′达柔′离体培养快繁技术体系的研究[J].山东农业大学学报(自然科学版)，200839(4)。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术存在的问题，提供一种蓝莓组培微繁育苗的方法，提高苗木繁殖速度。

本发明的技术方案是：一种蓝莓组培微繁育苗方法，生长季节从田间采集蓝莓新梢，无菌条件下，经表面消毒，用无菌水冲后，剪切成带1～2个芽的茎段，其特征是将带1～2个芽茎段接种到初代诱导培养基WPM+ZT 3.0mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L上，该培养基pH 5.4；经过2～3代的培养，获得无菌的、旺盛生长的、分枝多的组培无性系；在蓝莓组培苗继代增殖培养阶段，采用增殖培养基WPM+ZT 0.5～1.5mg/L+CPPU 0.05～1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，pH5.4；每50～60天一个继代周期。

本发明与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著进步及积极效果：

本发明在组培微繁时，以CPPU植物生长调节剂，其活性比6-苄氨基嘌呤高10～100倍，具有促进细胞分裂，促进细胞扩大伸长等作用。试验证明，CPPU能很好的诱导蓝莓芽的增殖和再生不定芽。本发明采用CPPU0.05～1.0mg/L与ZT0.5～1.5mg/L混合使用，繁殖系数提高5～10倍，加快了繁殖速度。

具体实施方式

实施例

本发明一种蓝莓组培微繁育苗方法，生长季节从田间采集蓝莓新梢，在无菌条件下，经过质量百分比0.1％氯化汞5～7分钟表面消毒，再用无菌水冲洗3遍后，剪切成带1～2个芽茎段接种到初代诱导培养基WPM+ZT 3.0mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，pH 5.4上。经过2～3代的培养，获得无菌的、旺盛生长的、分枝多的组培无性系。在蓝莓组培苗继代增殖培养阶段，采用增殖培养基WPM+ZT0.5-1.5mg/L+CPPU 0.05-1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，pH 5.4。每50～60天一个继代周期(重复相同的培养过程)。在蓝莓出瓶移栽之前2～3个继代培养周期中，采用WPM+ZT0.3～0.7mg/L培养基进行苗木复壮。培养室温度控制在25℃左右，采用目光灯照明，光照强度2000-4000Lux，每天16小时光照，8小时黑暗。