[发明专利]一种同步检测血清样本中多种抗体的蛋白悬浮芯片及其制备方法和使用方法

权利要求书

1.一种同步检测血清样品中多种抗体的蛋白悬浮芯片，其特征在于，该芯片包括：编码微球，作为包被编码微球抗原的西尼罗E蛋白、土拉fopA蛋白、登革热E2蛋白、禽流感H5蛋白，生物素标记的二抗和SPA作为捕获抗体，链亲和素-藻红蛋白和相关缓冲溶液。

2.一种同步检测多种抗体的蛋白悬浮芯片的制备方法，其特征在于，在相关缓冲溶液中，用西尼罗E蛋白抗原包被025号编码微球、用土拉fopA蛋白抗原包被028号编码微球、用登革热E2蛋白抗原包被031号编码微球、用禽流感H5蛋白抗原032号编码微球，用生物素标记的二抗为羊抗兔IgG或/和Biotin-SPA，用链亲和素-藻红蛋白(SA-PE)作为信号检测物。

3.一种采用蛋白悬浮芯片同步检测血清样品中多种抗体的间接免疫学定量检测方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：

1)将若干种蛋白抗原作为捕获抗原来包被编码微球；

2)向检测载体内加入含各已包被捕获抗原编码微球的工作溶液，用清洗液清洗；

3)加入待测血清样品，孵育后清洗；

4)加入用生物素化的二抗，孵育后清洗；

5)加入链亲和素-藻红蛋白，孵育后清洗；

6)加入检测缓冲液后混匀；

7)用悬浮芯片系统读取平均荧光强度数值并分析数据判定检测结果。

4.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中采用生物素标记的SPA作为捕获抗体，并且其与相应抗原组合组成间接法检测体系。

5.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述包被微球的捕获抗原西尼罗E蛋白、土拉fopA蛋白、登革热E2蛋白、禽流感H5蛋白抗原的用量为0.01～250μg/1.25×106个编码微球或0.004～1000ng/5000个微球/测试。

6.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中各已包被捕获抗原编码微球为，用西尼罗E蛋白抗原包被025号编码微球、用土拉fopA蛋白抗原包被028号编码微球、用登革热E2蛋白抗原包被031号编码微球、用禽流感H5蛋白抗原032号编码微球编码微球。

7.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述步骤4)中二抗为羊抗兔IgG或/和Biotin-SPA。

8.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述方法中的标记检测抗体羊抗人IgG或/和Biotin-SPA的生物素为羧基活性的生物素。

9.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述步骤4)中2mg/mL生物素化的检测二抗Bioin-SPA以1∶2500稀释作为检测物进行检测。

10.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述检测载体为96孔滤板或者微量离心管，所述检测步骤中全部反应在96孔滤板的孔或者微量离心管内进行。