[发明专利]猪圆环病毒2型亚单位疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1).克隆猪圆环病毒2型ORF2基因并引入信号肽基因序列，转入转移载体，获得包含猪圆环病毒2型重组ORF2基因的转移载体；

(2).包含猪圆环病毒2型重组ORF2基因的转移载体转化入含有穿梭载体的大肠杆菌感受态细胞中，获得包含猪圆环病毒2型重组ORF2基因的穿梭载体，再将该穿梭载体转染入昆虫细胞中，获得重组杆状病毒；

(3).重组杆状病毒感染昆虫细胞及昆虫细胞的培养；

(4).由重组杆状病毒的猪圆环病毒2型重组ORF2基因表达猪圆环病毒2型重组ORF2蛋白，收获和纯化猪圆环病毒2型重组ORF2蛋白；

(5).利用猪圆环病毒2型重组ORF2蛋白，辅以佐剂，经乳化，制备猪圆环病毒2型亚单位疫苗。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中猪圆环病毒2型ORF2基因序列包含序列表中SEQ ID NO1。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中信号肽基因序列包括蜂毒素信号肽核苷酸序列。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的蜂毒素信号肽核苷酸序列包含序列表中SEQ ID NO2。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(2)中所述重组猪圆环病毒2型ORF2基因的表达受多角体启动子的控制。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中所述的重组猪圆环病毒2型ORF2蛋白序列包含序列表中的SEQ IDNO3。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中所述的重组猪圆环病毒2型ORF2蛋白是下面任意一种多肽：

i)含有序列表中SEQ ID NO3序列的多肽；

ii)与i)所述多肽至少80％同源的多肽；

iii)含i)和ii)所述多肽的免疫原性部分的多肽。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(5)中所述的佐剂为水性佐剂或油性佐剂。

9.由权利要求1～7任意一项方法制备的猪圆环病毒2型ORF2蛋白。

10.由权利要求1～8任意一项方法制备的猪圆环病毒2型ORF2蛋白亚单位疫苗。

11.根据权利要求10所述的猪圆环病毒2型亚单位疫苗，其特征在于，所述疫苗包含至少1微克/头份的猪圆环病毒2型重组ORF2蛋白。