[发明专利]草鱼与团头鲂亚科间远缘杂交的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鱼类杂交的方法，尤其涉及一种鲤科鱼类中亚科间远缘杂交的方法。

背景技术

亲缘关系在种间或种间以上的杂交一般称为远缘杂交，它是鱼类性状改良常用的方法。远缘杂交作为一种重要的鱼类遗传育种和性状改良方法，它可以整合整套外源基因，从而改变杂交后代基因的表达调控，使得杂交后代可能在生长速度、抗逆性、抗病性以及肉质等方面表现出杂种优势。如红鲫与湘江野鲤的属间远缘杂交形成的杂交后代具有生长速度快、肉质鲜嫩、抗病力强、存活率高等优点，并且通过多代遗传选育，筛选出了两性可育的异源四倍体鲫鲤群体；红鲫与团头鲂的亚科间远缘杂交形成的三倍体杂交后代具有体背明显增高、外形优美等优点。

如何利用和改进现有的生物学技术和方法，挑选合适的亲本鱼进行远缘杂交，对其进行遗传改良以获得性状更为优良、品种更加丰富和对遗传研究更有意义的新型多倍体鱼，已成为本领域技术人员长期面临和需要解决的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种受精率高、孵化率高、后代性状优良、且对遗传育种具有重要意义的草鱼与团头鲂亚科间远缘杂交的方法。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为一种草鱼与团头鲂亚科间远缘杂交的方法，包括以下步骤：首先挑选雌性草鱼和雄性团头鲂作为亲鱼进行专池培育，然后在繁殖季节对所述亲鱼进行人工催产，挑选催产效果良好的亲鱼进行干法人工授精，对授精完成后的受精卵进行流水孵化，孵化的鱼苗在大面积的水泥池中进行饲养，对饲养后的杂交鱼进行检测、筛分，获得三倍体草鲂和二倍体草鲂。

上述的技术方案优选按以下具体的操作步骤进行：

1)亲鱼的选择和培育：在繁殖期前3～4个月，挑选性成熟特征明显、体征良好的雌性草鱼和雄性团头鲂作为远缘杂交的亲鱼进行专池培育，保持水质良好；在繁殖期前一个月以精饵饲养所述亲鱼，每隔2～3天流水刺激一次，以促进亲鱼性腺发育成熟；体征良好的亲鱼一般表现为体型好、体色鲜艳、体质健壮、无病无伤；

2)人工催产：在同年的5月中旬至6月上旬，当水温稳定在20℃以上时，为上述亲鱼注射黄体素释放激素类似物(LRH-A)、绒毛膜促性腺激素(HCG)与地欧酮的混合催产剂进行催产，所述黄体素释放激素类似物的用量为2μg/kg～3μg/kg，绒毛膜促性腺激素的用量为100IU/kg～150IU/kg，地欧酮的用量为1mg/kg～1.5mg/kg；先注射母本亲鱼，4h～5h后再注射父本亲鱼，父本亲鱼的注射剂量减半；注射完毕后按1∶(6～8)的数量比将母、父本亲鱼放入同一产卵池中(水面面积为80m²左右的产卵池)，然后视水情及时向池中冲水，尤其在产卵前3h～4h，注入一定水量后，停止注水，让鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精；注射时优选采用胸鳍基部无鳞处腹腔一针注射法，以提高亲鱼的存活率；

3)授精孵化：挑选产卵顺利的母本亲鱼，可以用我们特制的帆布担架固定，以便于操作和减少对母本亲鱼的损伤；然后与产精量大的父本亲鱼进行干法人工授精，得到的受精卵置于水温为19℃～20℃的孵化环道或人工孵化器中进行流水孵化；

4)饲养：鱼苗全部孵出后，于孵化环道或人工孵化器中继续培育2～3天，待鱼苗出现腰点后将鱼苗转入预先培肥的水泥池中饲养，1～2天后泼洒豆浆，2～3次/天，鱼苗长成后经检测、筛分获得三倍体草鲂和二倍体草鲂。

上述的技术方案中，所述的检测操作优选是指利用流式细胞DNA含量测定法、外周血细胞培养的染色体倍性检测方法和血涂片法对饲养后的鱼苗分别进行DNA含量、染色体数目以及血细胞大小的检测。