[发明专利]一种用于核酸反应检测的容器和方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于核酸反应检测，特别核酸快速扩增反应及扩增产物检测的容器，以及应用该容器进行核酸反应检测的方法。

背景技术

核酸扩增技术被广泛应用于医学，法医学，分子生物学，基因诊断，法医学等各个领域。由于强大的扩增效率，交叉污染是各个实验室面临的难题。多种方法被提出，用于解决这一难题，其中包括采用UNG/dUTP防污染系统，分隔房间进行样品处理，扩增和检测等。

荧光定量PCR是近年来发展起来的新技术。由于PCR反应和检测在一个试管中进行，不用打开试管，较好地克服了传统PCR技术易污染的缺点。荧光定量PCR的缺点是试剂和仪器昂贵，对操作人员的技术要求高，普及率低。荧光定量PCR的探针或染料与其他反应成分在一个反应体系中，有时探针或染料会影响PCR反应效率，从而降低灵敏度。

在申请号为PCT/CN/2007/070249，名称为“全封闭式靶核酸扩增物快速检测装置”的国际专利中，申请人提供一种全封闭靶核酸扩增物快速检测装置和方法。其包括：扩增反应完成后，不打开反应管，将未开盖的反应管放入封闭性装置，将靶核酸扩增产物在物理性封闭的环境中转移至试纸条上，以肉眼可视的形式予以检测，检测后不打开所述封闭性装置，将其整体废弃于安全处。此装置的缺点是，装置制备复杂，价格较贵，废弃时环保差，此方法，虽然不打开试管盖，但仍需刺开底部，仍有泄漏的危险。

如上所述，这一领域仍然有对更简易低成本核酸反应检测的装置和方法的需求。本发明提供一种全封闭式的用于核酸反应检测的容器，极好的解决了上述问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简便且低成本的用于核酸反应检测的容器。本发明还提供应用该容器进行核酸反应检测的方法。

本发明所提供的用于核酸反应检测的容器整体为可密封的，容器内部被隔片隔开为不同分室，隔片的上部具有液体流动通道，不同分室中的液体只能通过液体流动通道在分室之间流动。

所述容器可以是塑料试管，也可以是离心管或PCR管。

所述容器的密封方式可以是盖体密封，盖体可以与容器相连，也可以是独立的、不与容器相连。所述容器的密封方式也可以是胶带密封，胶膜密封等，或用热封的方法进行密封。所述密封可以是重复进行，也可以是一次性进行，容器密封后不再打开。

所述容器可以被一个隔片隔开为两个分室，也可以被两个隔片隔开为三个分室，也可以被多个隔片隔开为多个分室。

所述液体流动通道可以一直为打开状态，也可以是可调控通道，此调控通道在自然状态下关闭，当需要打开时，则在外部因素的作用下打开通道。所述可调控通道的调控方式包括：(1)通道的开启通过外力的作用，如挤压使试管变形导致通道打开；(2)可调控通道为帘式门，当试管向一侧倾斜时，在重力的作用下，帘式门打开，在自然竖立或向另一侧倾斜时，此帘式门关闭；(3)可调控通道还可以通过化学反应、电磁反应或其他外部物理作用使得通道打开。所述液体流动通道可以为双向流动，即允许液体从一室向另一室移动，也允许反向移动，也可以为单向流动，即允许液体从一室向另一室移动，但不允许反向流动。

例如，所述容器为试管，当试管处于正常竖立状态时，一个室的液体不能流入另一个室；当试管处于反转倒立，或倾向状态时，一个室的液体能流入另一个室，或两个室的液体可以混合，其中至少一室用于生物或化学反应，至少另外一室用于检测生物或化学反应的产物，此另外一室含有用于检测生物或化学反应产物的试剂或装置。除了以上提到的用把试管反转倒立，或倾向方式达到把一个室的液体能流入另一个室，或两个室的液体可以混合的目的，其他任何方式，只要能达到此结果都可以用，比如用物理挤压方式，震荡方式，离心方式，电磁作用方式，化学反应方式等，这些方式可以用来打开两室之间的通道，从而实现一个室的液体能流入另一个室，或实现两个室的液体可以混合的目的。

本发明还提供一种应用上述容器进行核酸反应检测的方法，其步骤包括：

1)将核酸反应试剂添加到容器的一个分室，检测试剂或物品添加到容器的另外分室；

2)将容器进行密封；

3)核酸反应在容器的一个分室中进行；

4)反应完成后，操作容器使得核酸反应分室中的产物流入装有检测试剂或物品的分室并与检测试剂或物品混合。

5)对反应结果进行检测。

所述核酸反应可以是核酸扩增反应，如PCR反应或恒温扩增反应，核酸扩增反应可以是扩增一段或几段从任何生物来源的DNA或RNA，包括细菌，病毒，植物，动物，真菌，人等。