[发明专利]多重PCR检测食品中肉类来源的引物组及试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物基因工程技术领域，涉及多重PCR检测食品中肉类来源的引物组及检测试剂盒。 

背景技术

目前的肉制品市场中，一些单位和个人为了追求自身利益而以鸡肉充猪肉，以猪肉充牛肉等，用低价劣质的肉冒充高价优质的肉，这极大的损坏了消费者的利益和健康。由于国家没有规定统一的肉类检测方法，也没有形成成熟、快速简便的检测肉类来源的行业方法，目前质监部门主要是通过肉制品的味道、色泽、肉类的纹理等进行肉类来源的判别工作，这些传统鉴别方法对于市场上假冒生肉的鉴别起到了非常重要的作用。但是，对于很多熟肉制品(如香肠)来说，加入的肉经过了粉碎处理，并且添加了香料掩盖了原有的味道，传统的方法难以进行准确的肉类来源鉴定。 

目前，市场上经过加工的熟肉制品质量越来越难以鉴定，国家及地方各级质监部门急需要一种分析食品中的肉类来源的方法能够快速，有效的对肉类开源进行检测。分析食品中的肉类来源的方法主要有两种：应用抗体特异性的ELISA法和基于核酸特异性的PCR法。由于肉制品加工过程中蛋白质容易变性，导致ELISA法鉴定肉类来源的稳定性较差，容易出现偏差，且检测步骤复杂，时间长，不利推广。而PCR方法基于核酸的特异性，不受高温的影响。食品的肉类中含有大量的核酸分子，通过合成种属特异的引物并进行PCR，可以灵敏，快速的确定肉质中的肉类来源，如果找到一种能同时检测熟肉制品多种来源肉的种类，将可以大大缩短了检测的时间，提高了检测的效率，更利于应用于实际。 

发明内容

本发明的目的是克服现有技术存在的不足，提供一种多重PCR检测食品中肉类来源的引物组。 

本发明的第二个目的是提供一种多重PCR检测食品中肉类来源的试剂盒。 

本发明的技术方案概述如下： 

一种多重PCR检测食品中肉类来源的引物组，由检测猪肉引物对、检测鸡肉引物对、检测牛肉引物对和检测羊肉引物对组成，所述检测猪肉引物对的上下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，所述检测鸡肉引物对的上下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列，所述检测牛肉引物对的上下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列，所述检测羊肉引物对的上下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列。 

一种多重PCR检测食品中肉类来源的试剂盒，该试剂盒包括引物组、PCR管和2×Taq PCR反应混合试剂，所述引物组由检测猪肉引物对、检测鸡肉引物对、检测牛肉引物对和检测羊 肉引物对组成，所述检测猪肉引物对的上下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.1、SEQ IDNO.2所示的核苷酸序列，所述检测鸡肉引物对的上下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列，所述检测牛肉引物对的上下游引物分别是序列表中SEQ IDNO.5、SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列，所述检测羊肉引物对的上下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列。 

本发明的引物组可以应用于多重PCR技术检测食品中肉类来源。本发明的试剂盒可以灵敏，快速地确定熟肉制品中的肉类来源，多重PCR方法更是缩短了检测的时间，提高了检测的效率，将多重PCR方法应用于食品检测领域。 

附图说明

图1应用多重PCR进行肉类来源分析的琼脂糖电泳图。 

图中第1泳道是marker，第2条泳道是四重PCR结果，第3，4，5，6泳道分别是猪，牛，羊，鸡的单重PCR结果。 

图2应用多重PCR进行市场中香肠肉类来源分析的琼脂糖电泳图。 

图中第1泳道是DNAmarker(100bp，250bp，500bp，750bp，1000bp，2000bp)，第2，3，4，5泳道分别是猪，牛，羊，鸡的单重PCR结果，第6泳道是牛肉肠A的多重PCR检测结果，第7泳道是牛肉肠B的多重PCR检测结果。 

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。 

实施例1 

本发明是对于食品中肉类来源的检测，通过PCR反应扩增出来的产物长度分别为猪：136bp，牛：705bp，羊：199bp，鸡：327bp。 

一.肉制品中DNA的提取 

样品处理：将等质量的猪、牛、羊和鸡肉组织样品研充分磨备用。