[发明专利]用于在植物繁殖组织中表达基因产物的调控序列有效
申请号: | 201010239753.X | 申请日: | 2005-04-19 |
公开(公告)号: | CN101914530A | 公开(公告)日: | 2010-12-15 |
发明(设计)人: | M·L·努乔;M·L·拉格里米尼;M·迈格吉 | 申请(专利权)人: | 辛根塔参与股份公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 罗菊华 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 植物 繁殖 组织 表达 基因 产物 调控 序列 | ||
1.构建表达盒的方法,包括步骤:a)选择靶基因;b)确定所述靶基因的启动子、翻译起始密码子、翻译终止密码子、第一个内含子、第一个外显子和第二个外显子;c)构建以5′至3′方向包含所述启动子、第一个外显子、第一个内含子和第二个外显子的5′-调控序列;并d)将核酸分子与所述5′-调控序列可操作性地连接,从而构建出所述表达盒,其中所述核酸分子进行表达。
2.依照权利要求1的构建表达盒的方法,其中所述靶基因是MADS基因。
3.依照权利要求1的构建表达盒的方法,其中所述核酸分子是蔗糖转运蛋白基因。
4.依照权利要求1的构建表达盒的方法,其中所述核酸分子是转化酶基因。
5.依照权利要求4的构建表达盒的方法,其中所述转化酶基因是可溶性的酸性转化酶基因、可溶性的中性转化酶基因或不溶性的酸性转化酶基因。
6.依照权利要求1的构建表达盒的方法,其中所述核酸分子是海藻糖代谢基因。
7.依照权利要求6的构建表达盒的方法,其中所述海藻糖代谢基因是海藻糖-6-磷酸合酶基因、海藻糖-6-磷酸磷酸酶基因或海藻糖酶基因。
8.依照权利要求1的构建表达盒的方法,进一步包括在所述5′-调控序列的3′末端改造翻译起始密码子的步骤。
9.依照权利要求1的构建表达盒的方法,进一步包括改造所述表达盒使其不含有妨碍用重组DNA方法进行操作的限制性内切核酸酶位点或所述翻译起始密码子上游的另外的翻译起始密码子。
10.依照权利要求1的构建表达盒的方法,其中所述5′-调控序列选自SEQ ID NOS.6、12、20、28、506、34、39、43、47、51、55、59、63、67、71、75、79、83、87、91、95、99、103、107、111、115、119、123、127、131和526。
11.依照权利要求1的构建表达盒的方法,其中所述3′-调控序列选自SEQ ID NOS.10、16、24、30、507、36、40、44、48、52、56、60、64、68、72、76、80、84、88、92、96、100、104、108、112、116、120、124、128、132和527。
12.依照权利要求1的构建表达盒的方法,其中所述靶基因是基于其表达数据而选定的。
13.依照权利要求1的构建表达盒的方法,其中所述核酸分子以模拟所述靶基因表达的方式进行表达。
14.依照权利要求1的构建表达盒的方法,其中所述表达盒进一步包含含有所述靶基因的3′-非翻译序列和3′-非转录序列的3′-调控序列,所述3′-调控序列与所述核酸分子可操作性地连接。
15.赋予植物以非生物性压力耐受性的方法,包括构建含MADS基因家族的5′-调控和3′-调控序列的表达盒的步骤。
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