[发明专利]一种利用白腐菌生物预处理强化秸秆发酵产甲烷及其制备方法

权利要求书

1.一种利用白腐菌生物预处理强化秸秆发酵产甲烷，其特征是：采用如下原材料：秸秆：取无髓的稻，去根及穗，风干后粉碎，过筛，截取能通过40目筛，但不能通过60目筛的细末；菌种：采用白腐菌典型菌种——黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)；培养基：葡萄糖10g，蛋白胨3g，酵母浸膏2g，微量元素70mL，琼脂20g，蒸馏水至1000mL，用盐酸将pH调节为4.5，于121℃下灭菌20min，微量元素混合液(g·L)：氨基乙酸0.5；马铃薯培养基：去皮马铃薯200g，切成块加水煮沸30min，再加葡萄糖200g，琼脂15～20g，蒸馏水至1000mL，用盐酸将pH调节为4.5。

2.一种制备如权利要求1所述的利用白腐菌生物预处理强化秸秆发酵产甲烷的方法：其特征是：包括如下步骤：

(1)秸秆生物预处理：培养基上接种白腐菌，28℃培养一周后，使用直径为1am的打孔器打出3块，接种到100mL马铃薯培养基中，28℃、160r·min培养24h成为菌悬液，取菌悬液10mL分别加到90mL马铃薯培养基中，28℃、160r·min培养3d后与粉碎成2am长的稻草秸秆60g一起加入到反应器中加水定容至5L，调pH值为4.5，在恒温反应器中分别于室温和39℃下进行曝气处理；

(2)秸秆处理液作为菌源的连续序批式预处理方法39℃、10d预处理条件不变，按1/10的接种量将第一批秸秆生物预处理液转接到新的秸秆好氧发酵液中进行序批式处理，连续转接2次；

(3)发酵种泥的驯化：将15g稻草粉加入到600mL、接种生物量为13.1gSS·L的厌氧污泥中，并加入1g蔗糖和5mL的无机盐营养液，使C∶N∶P约为200∶5∶1，为保证反应系统处于无氧条件，用氮气吹脱后使用水封法于摇床中在(35~1)℃下进行驯化培养。

(4)厌氧发酵产甲烷：将驯化成熟的厌氧污泥以3000r·min离心，弃去上清液，加入清水进行厌氧发酵，即可产甲烷。