[发明专利]一种简化的脐带间充质干细胞的规模化制备方法有效
| 申请号： | 201010246359.9 | 申请日： | 2010-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN101914496A | 公开（公告）日： | 2010-12-15 |
| 发明（设计）人： | 魏斯溧;高宏;王丽;胡建霞;张学峰;张美荣 | 申请（专利权）人： | 青岛奥克生物开发有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 简化 脐带 间充质 干细胞 规模化 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1)新鲜脐带，用PBS缓冲液冲洗；
2)剪取6-8cm长脐带，将脐带剪成2cm长的小段，用PBS缓冲液反复冲洗；
3)将脐带组织块剪碎成2-3mm3小块；
4)将剪碎组织加入L-DMEM培养基洗涤，在650g条件下离心5分钟，弃上清；
5)将组织块和培养基按体积比2.5-3∶1比例加入培养基，混匀组织块，接种至细胞培养皿中，置培养箱培养；所述的培养基为含1-10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子及体积百分比10％-15％胎牛血清的L-DMEM培养基；
6)24小时后补加步骤5所述的培养基；
7)每3天换一次培养基，第6天后换含体积比10％胎牛血清的L-DMEM培养基，至8-9天细胞达80％左右融合时传代；传代培养基为含体积比10％胎牛血清的L-DMEM培养基；
8)以后每3天传代一次。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述PBS缓冲液含100kU/L青霉素及100mg/L链霉素。
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