[发明专利]腺病毒介导白介素-24制备放疗增敏药物的应用

说明书

技术领域

本发明属于放疗增敏药物领域，具体涉及腺病毒介导白介素-24基因在放疗增敏领域的应用。

背景技术

放射治疗是肿瘤治疗的常规手段之一，70％～80％的恶性肿瘤患者在治疗过程中需接受放疗。肿瘤对辐射不敏感或对辐射产生抗拒性，是放射治疗难以根治恶性肿瘤的主要原因之一。近年来，随着对肿瘤发病分子机制及细胞生长调控机理研究的深入，肿瘤基因治疗已取得一些令人振奋的成果，但针对单一环节的转基因治疗常常不能达到令人满意的治疗效果。Weichselbaum等于1994年提出肿瘤基因-放射治疗的新思路，其原理是将辐射诱导型基因的调控序列与肿瘤杀伤基因相耦联，转染肿瘤细胞，对肿瘤实施局部照射同时诱导基因表达，通过射线与基因的双重作用杀伤肿瘤，以达到降低照射剂量、缓解正常组织损伤的目的。因此，将放射治疗与基因治疗相结合，事半功倍，已成为肿瘤治疗研究的重要方向之一，目前肿瘤基因联合放射治疗的有关机制主要有如下几种(参见：田玥，苏成海.国际放射医学核医学杂志.2008 32(1))：①免疫基因治疗与放射治疗的联合；②抑癌基因与放射治疗的联合；③自杀基因治疗与放射治疗的联合；④抗血管生成基因治疗与放射治疗的联合；⑤特异性启动子基因治疗与放射治疗的联合；⑥辐射保护性基因治疗与放射治疗的联合。

现有技术中，关于腺病毒介导白介素-24(Ad-IL-24)的报道，主要集中在其抑制肿瘤方面的应用，近年来国外大量研究资料已证明，Ad-IL-24对肿瘤有抑制生长和促进凋亡作用，并能调节IL-6，TNF-α，IFN-γ等细胞因子的分泌；在国内本课题组成员对此作了大量的研究，研究结果显示Ad-IL-24具有特异的抗肿瘤作用，对正常细胞无伤害作用；在美国Ad-IL-24已经进入肿瘤基因治疗的I期临床。

另外，申请号为200910025316.5的中国发明专利申请公开说明书公开了人白介素-24基因腺病毒载体在制备治疗癌痛药物中的应用，包括以下步骤：(1)构建重组转移质粒pAdTrack-CMV-IL-24；(2)用测序正确的pAdTrack-CMV-IL-24按照常规方法制备阳性克隆pAdEasy-1-pAdTraek--CMV-IL-24重组质粒；(3)将pAdEasy-1-pAdTraek-CMV-IL-24基因重组质粒进行病毒包装，经多轮扩增后，可获高滴度的重组腺病毒子(Ad-IL-24)。(4)用Ad-IL-24感染肿瘤组织，并结合大鼠胫骨癌痛模型的镇痛测试，结果不仅证明了Ad-IL-24具有共识的抑癌功能，而且腺病毒介导白介素-24基因在细胞中的表达可以通过多种途径发挥抑制癌痛的作用。

然而Ad-IL-24作为放疗增敏剂的应用国内外至今未见报道。

发明内容

本发明目的是提供腺病毒介导白介素-24基因表达载体Ad-IL-24的新应用，即腺病毒介导白介素-24基因表达载体Ad-IL-24制备放疗增敏药物的应用。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：腺病毒介导白介素-24基因表达载体Ad-IL-24在制备放疗增敏药物中的应用。

本发明同时要求保护一种放疗增敏药物，所述放疗增敏药物的活性成分包括腺病毒介导白介素-24基因表达载体Ad-IL-24。

本发明还提供了一种应用腺病毒介导白介素-24基因表达载体Ad-IL-24增强肿瘤细胞对放疗敏感性的方法，放疗前将腺病毒介导白介素-24基因表达载体Ad-IL-24导入肿瘤细胞，使人类IL-24基因在肿瘤细胞中表达，然后进行放疗。

上述技术方案中，腺病毒介导白介素-24基因表达载体Ad-IL-24的制备方法为现有技术，可以参见申请号为200910025316.5的中国发明专利申请公开说明书。

上述技术方案中，所述肿瘤细胞为肺腺癌肿瘤细胞。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：

本发明所述腺病毒介导的IL-24单基因表达具有显著性抑制SPC-A1肺腺癌细胞生长和诱导细胞凋亡的作用；Ad-IL-24联合放疗对SPC-A1肺腺癌细胞的细胞毒作用和诱导凋亡的作用高于Ad-IL-24单纯组和单一放疗组，均呈现明显放疗增敏协同效应。

附图说明

图1为实施例一中重组腺病毒介导的IL-24基因在SPC-A1细胞中的转录鉴定，其中，1.PBS；2.AdV；3.Ad-IL-24；M.：DL2000marker；

图2为实施例一中重组腺病毒介导的IL-24基因在SPC-A1细胞中的表达鉴定，其中，1.PBS；2.AdV；3.Ad-IL-24；