[发明专利]一种中药复方板蓝根颗粒的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，具体涉及一种中药复方板蓝根颗粒的质量检测方法，

背景技术

复方板蓝根颗粒是中华人民共和国卫生部药品标准所收载的中药成方制剂，具有清热解毒、凉血之功效，用于治疗温病发热、出斑、风热感冒、咽喉肿烂、流行性乙型脑炎、肝炎和腮腺炎等^[1]。现代药效学研究表明，复方板蓝根颗粒具有解热、抗炎以及治疗病毒性心肌炎的作用^[2，3]。目前，对复方板蓝根颗粒的质量控制方法主要是基于靛蓝、靛玉红等成分的定量分析^[4，5]，不足以从整体上控制复方板蓝根颗粒的质量。作为临床常用制剂，其真伪优劣受其药材来源、生产过程等诸多因素的影响，因此，有必要建立一种科学的质量检测方法对复方板蓝根颗粒的质量进行评价。(参考文献：[1]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准[M].第十二册.[2]贾德武.复方板蓝根颗粒解热抗炎作用的实验研究[J].中医药临床杂志，2008，20(4)：358-359.[3]马维勇，陆仁英，许帆.复方板蓝根颗粒治疗病毒性心肌炎的疗效观察[J].实用心脑肺血管病杂志，2003，11(3)：135-138.[4]李向阳，屠万倩，李振国.HPLC法测定复方板蓝根颗粒中靛玉红的含量[J].中医研究，2005，18(7)：18-19.[5]孙立新，佟立今，毕开顺.复方板蓝根颗粒定量方法的研究[J].中国现代应用药学杂志，2002，19(2)：138-140.)

发明内容

本发明的目的是提供一种中药复方板蓝根颗粒的质量检测方法。该方法利用中药复方板蓝根颗粒的电喷雾质谱做指纹图谱，利用高效液相色谱法测定了中药复方板蓝根颗粒中尿苷的含量，并利用紫外-可见分光光度法测定了中药复方板蓝根颗粒中总黄酮的含量，保证了中药复方板蓝根颗粒质量检测方法的科学性和质量检测的先进性。

本发明利用软电离质谱技术对中药复方板蓝根颗粒进行检测，根据得到的中药复方板蓝根颗粒的电喷雾指纹图谱中特征指纹峰的个数及强度，对中药复方板蓝根颗粒的质量进行初步评价；考虑到中药复方板蓝根颗粒中含有多种核苷类成分，并且以尿苷为主，因此本发明以尿苷作为标准对照品，通过高效液相色谱测定，得到尿苷标准对照品对应色谱峰的峰面积，根据标准曲线测定供试样品中尿苷的含量；本发明还考虑到中药复方板蓝根颗粒中含有多种黄酮类成分，因此本发明利用紫外-可见分光光度法，采用芦丁作为标准对照品，硝酸铝与黄酮类化合物形成配合物的显色原理进行测定黄酮类成分，完成一种中药复方板蓝根颗粒的质量检测方法。

实施本发明的技术方案如下：

(1)中药复方板蓝根颗粒电喷雾指纹图谱测定

①中药复方板蓝根颗粒供试样品溶液的制备

称取中药复方板蓝根颗粒2-10g，加10-50mL水溶解，干燥后置于10mL容量瓶中，加50％(V/V)甲醇定容至10mL，过滤，即为供试品溶液；

②中药复方板蓝根颗粒供试样品的电喷雾指纹图谱

取5-10μL供试品溶液，用甲醇稀释至100-500μL，做电喷雾质谱分析，电喷雾质谱实验条件如下：电喷雾电离源，正离子电离方式，喷雾电压为4.0-5.0kV，毛细管温度180-250℃，流动注入泵进样流速3-8μL/min，扫描范围质荷比(m/z)50-1000，在m/z100-350范围内，存在m/z104、m/z116、m/z133、m/z175、m/z182、m/z185、m/z203、m/z210、m/z287和m/z337离子。

(2)中药复方板蓝根颗粒中尿苷的含量测定

①高效液相色谱实验条件：C₁₈色谱柱：4.6mm×250mm，5μm；柱温：20-35℃；流动相：水和甲醇；水与甲醇体积比为90∶10-95∶5；洗脱时间：15-30min；紫外检测器检测波长：230-280nm；样品进样量：5-20μL；

②尿苷标准对照品溶液的配制：取1mg的尿苷标准对照品，加50％(V/V)甲醇定容至10mL，配成尿苷标准对照品溶液；

③尿苷线性关系的考察：将尿苷标准对照品溶液以4、8、12、16、20μL进样，测得尿苷标准对照品的高效液相色谱峰面积；以所得尿苷标准对照品峰面积为纵坐标，对应尿苷标准对照品的进样质量为横坐标，计算得线性回归方程；