[发明专利]一种假单胞菌DA10菌株及其获得方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于假单胞菌菌株及其应用领域，特别涉及一种假单胞菌DA10菌株及其获得方法和应用。 

背景技术

亚麻纤维天然古朴、色彩柔和，具有独特的凉爽舒适性，是化学纤维所不具备，其它天然纤维不可比拟的，被誉为“植物纤维中的皇后”。亚麻产品具有手感滑爽、纹理自然、色调柔和、结实耐用等风格，并且具有杀毒抗菌、防紫外线、低静电、低磁场效应等天然功能，在风格与功能上独树一帜，具有“绿色保健”的特点，因此倍受消费者青睐，是国际市场上最受欢迎的纺织商品之一。 

目前，生产上普遍采用传统的亚麻温水沤麻、雨露沤麻及天然水沤麻等方法，均利用天然微生物及其酶对亚麻的果胶、半纤维素和木质素等胶质进行降解，菌株混杂，难以进行有效的控制，导致脱胶时间长(温水沤麻约为4d；雨露沤麻为15-20d；天然水沤麻5-7d)、综合长麻率低、质量不稳定(束纤维强力低)和环境污染重等诸多问题，严重制约着亚麻产业的大力发展。尽管20世纪以来，微生物学得到了迅速发展，麻类作物中微生物工程技术的研究也取得了较大的进展。虽然将微生物及其产生的酶类应用于亚麻脱胶不仅可以提高纤维的产量和品质，耗能少、使用安全，可减轻对环境的污染，具有良好的前景，但是其产业化一直未能实现。因此，筛选、分离亚麻脱胶优势菌群并将其应用于亚麻脱胶以实现亚麻微生物快速脱胶非常重要。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种假单胞菌DA10菌株及其获得方法和应用，本发明提供菌株及培养系统能够直接用于亚麻脱胶，具有脱胶周期短，纤维分散率达100％，脱胶效率达95％；与现有技术相比，本发明具有工艺简单、适合大规模工业化生产等特点，对于探索假单胞菌菌株在碱性条件下进行亚麻脱胶具有潜在的理论和实践意义。 

本发明的一种假单胞菌DA10菌株(CGMCC No.3851)，其特征在于：该菌株具有产果胶酶和半纤维素酶能力，具有亚麻脱胶活性。 

本发明的一种假单胞菌DA10菌株的获得方法，包括： 

(1)从东海舟山海域取样腐烂海草，先将海草与富集培养基按1g∶20ml的比例于富集培养基中室温静置培养30天，然后取0.1ml富集培养基涂布于分离培养基，37℃静置培养1～4天，获得自野生型脱胶优势菌株； 

其中，富集培养基配方为：亚麻粉5g，无菌水200ml，pH自然；分离培养基配方为：亚麻粉5g，(NH₄)₂SO₄ 5g，K₂HPO₄ 1g，MgSO₄ 0.5g，KCl 0.5g，FeSO₄ 0.01，琼脂20g，水1000mL，用NaOH将pH调节到9； 

(2)将步骤(1)中得到的菌株接种到果胶营养培养基中，28℃培养72h，带菌落形成后，加入0.2％刚果红水溶液染色4h，倒去表面剩余刚果红溶液，加入少量蒸馏水荡去薄层表面刚果红，对光即可见明显的绛红色水解圈，在菌落周围出现绛红色水解圈者即为果胶分解菌(测量果胶琼脂平板上菌周围的透明圈直径和菌落直径，水解圈与菌落直径之比大者一般有较高果胶酶活力)； 

然后将果胶分解菌接种到半纤维素营养培养基中，28℃培养72h，即可见水解圈(测量水解圈和菌苔大小，并计算二者大小之比，水解圈与菌落直径之比大者一般有较高半纤维素酶活力)； 

(3)通过透明圈法从上述培养基中选择出具有产果胶酶和半纤维素酶能力的菌株。所述步骤(2)中的果胶营养培养基，其组分包括： 

果胶                 2g 

NANO3                3g 

K2HPO4               0.5g 

MgSO4                1g 

琼脂                 20g 

水                   1000mL 

pH                   自然，7.0-7.2 

半纤维素营养培养基，其组分包括： 

半纤维素(自制)       20g 

NH4NO3               2g 

K2HPO4               2g 

MgSO4                0.2g 

酵母膏               5g 

琼脂                 20g