[发明专利]一种用模式生物斑马鱼研究药物代谢的新方法

权利要求书

1.一种用模式生物斑马鱼研究药物代谢的新方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取斑马鱼的成体鱼放入盛有水的容器里，分为空白溶液组，空白鱼组、空白药物组和药物鱼组，空白溶液组和药物鱼组斑马鱼数量相等，将受试药物配成所需浓度，加入到药物鱼组的水溶液中，空白对照组加入等量的溶媒，空白鱼组只加等量溶媒不放斑马鱼、空白药物组加溶媒溶解的等量药物不放斑马鱼，在药物鱼组的斑马鱼暴露于药液后0h～24h内不同时间点将鱼取出，用纯净水迅速洗涤2～3次，处死，去除鱼鳍和鱼磷，称重，于-70℃冰箱放置，并取各时间点鱼药液，于-70℃冰箱放置，空白溶液组，空白鱼组和空白药物组于0h和24h时同法取样，备用；

(2)取步骤(1)得到的各时间点鱼药液冷冻干燥，残渣加适量溶剂溶解，过0.45μm或0.22μm滤膜或15000转/min离心，取滤液或上清液进行高效液相色谱HPLC分析或高效液相色谱与质谱联用LC-MS分析；取各时间点斑马鱼鱼体剪碎，称重，匀浆，匀浆液加甲醇或乙腈除蛋白，或匀浆液离心后直接用溶剂萃取药物成分，离心取上清或合并萃取液，氮气吹干，残渣加溶剂溶解，过0.45μm或0.22μm滤膜或约15000转/min离心，滤液或上清液进行HPLC分析或LC-MS分析。

2.根据权利要求1所述的用模式生物斑马鱼研究药物代谢的新方法，其特征在于，步骤

(1)中药物鱼组的斑马鱼暴露于药液后0h，1h，2h，4h，6h，8h，12h，18h，24h时间点将鱼取出，并取鱼药液。

3.根据权利要求1所述的用模式生物斑马鱼研究药物代谢的新方法，其特征在于，步骤(1)所述的溶媒为水或者是含有0～1％二甲基亚砜助溶剂的水溶液。

4.根据权利要求1所述的用模式生物斑马鱼研究药物代谢的新方法，其特征在于，步骤(2)根据被分析药物的性质选择溶剂溶解或萃取。

5.根据权利要求1所述的用模式生物斑马鱼研究药物代谢的新方法，其特征在于，步骤(2)采用Agilent 1100型系列高效液相色谱仪或Waters Alliance 2695-ZQ 2000高效液相色谱-质谱联用仪。

6.根据权利要求1至5任一项所述的用模式生物斑马鱼研究药物代谢的新方法，其特征在于，所述的受试药物为化学药品、中药、中药复方、天然药物或它们的组合物。

7.根据权利要求6所述的用模式生物斑马鱼研究药物代谢的新方法，其特征在于，所述的受试药物为丹参酮类化合物、丹参药材或含有丹参的中药复方、中成药。