[发明专利]大豆耐低磷基因GmAPt的分子标记方法有效
| 申请号： | 201010258526.1 | 申请日： | 2010-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN101921758A | 公开（公告）日： | 2010-12-22 |
| 发明（设计）人： | 喻德跃;张丹;程浩 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 张素卿 |
| 地址： | 21009*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 大豆 耐低磷 基因 gmapt 分子 标记 方法 | ||
【权利要求书】：
1.大豆耐低磷基因GmAPt的分子标记引物，其序列为，
Indel-SSR正向引物序列：CTTGAGATCACTACAACACACC
Indel-SSR正向引物序列：GATAGAAGAACAACACAAAAAC；
2.权利要求1所述引物用于鉴定大豆耐低磷基因GmAPt的分子标记方法，包括：
(1)大豆材料基因组DNA的提取；
(2)对大豆基因组DNA进行PCR扩增；
PCR扩增反应体系为：EXTaq×Master PCR Mix 5μL，3pmol/L Primer2.0μL，15ng/μL模板DNA2μL，灭菌双蒸水1μL；反应总量10μL.PCR反应在MJ ResearchPTC-200热循环仪上进行，反应程序包括：94℃预变性5min，每个循环95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共30个循环，最后72℃延伸7min，12℃保存；
(3)反应产物在质量比8％非变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳，用硝酸银染色，电泳结果如果有302bp的单条谱带，则为含大豆耐低磷基因GmAPt的耐低磷材料；如果有312bp单条谱带，则为不含大豆耐低磷基因GmAPt的大豆材料。
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