[发明专利]人乳头瘤58型病毒E7蛋白的线性抗原表位最小基序肽

说明书

技术领域

本发明属于生物医药与生物检测技术领域，具体涉及与妇女宫颈癌发生密切相关的高危型人乳头瘤病毒（HPV）58型E7致癌蛋白的全部线性B细胞表位（B cell epitope, BCE,或称抗原决定簇）及其最小基序肽，以及这些表位基序肽的应用。

背景技术

人乳头状瘤病毒（human papillomavirus, HPV）是可感染女性生殖道等上皮组织的一组病毒总称。已清楚超过100种以上的HPV病毒都编码6个E1、E2、E4 ～ E7早期蛋白和2个L1和L2后期蛋白（Stanley MA. Human papillomavirus vaccines. Rev Med Virol, 16: 139-149, 2006），其中持续感染可导致妇女子宫颈癌等高危型HPV（如HPV16和HPV18等）编码的E7蛋白已被证明具有强致癌性。因此，高危型HPV的E7蛋白是目前研制宫颈癌免疫治疗的重要靶点之一（Preville X, et al. Cancer Res,65: 641-649, 2005）。

HPV58也是紧随16和18型之后的高危型HPV病毒之一（Lungu O， et al. Obstet Gynecol, 47: 337-342 , 1995）。最近的研究资料表明HPV58型在我国江西、上海、河北、北京、香港和台湾等地区等子宫颈癌患者中的检出阳性率也相当高（Lin QQ, et al. Int J Cancer, 75: 484-485, 1998; Huang S, et al. Int J Cancer, 70: 408-411, 1997; Cai HB, et al. Oncol, 76: 157-161, 2009; Zhao R, et al. Br J Cancer, 101: 1635-1640, 2009; Lai HC, et al. Int J Cancer, 84: 553-557, 1999; Chan PK, et al. J Med Virol, 59: 232-238, 1999; Bao YP, et al. Int J STD AIDS, 19: 106-111, 2008），有的地区检出率高于HPV18型，甚至与HPV16的相当（李洁等. 中华实验和临床病毒学杂志，10: 50-55, 1996; 刘宝印等. 中华实验和临床病毒学杂志， 10: 118-121, 1996）。

很显然，靶蛋白上线性抗原表位（BCE）的扫描作图定位是研制特异肽疫苗和特异检测肽抗原的基础。但是，以往的E6和E7表位研究都主要集中于HPV16和HPV18（Dillner J, et al. Int J Cancer, 45: 529-535, 1990; Bleul C, et al. J Clin Microbiol, 29: 1579-1588, 1991; Gao L, et al. J Gen Virol, 75: 157-164, 1994），而HPV58型E7蛋白线性表位鉴定一直未有开展。

因此，基于上述HPV58型在我国妇女中的高流行性和这一病毒型表位鉴定的缺失，以及为了研制具我国自主知识产权的HPV治疗性嵌合肽（组合细胞毒性T细胞表位和BCEs）疫苗和可特异检测HPV58型病毒的诊断试剂盒，我们用大肠杆菌表达HPV58型E7蛋白并制备了兔抗重组E6蛋白抗血清，结合采用申请人改良的生物合成肽策略（Xu, et al. Minimal motif mapping of a known epitope on human zona pellucida protein-4 using peptide biosynthesis strategy. J Reprod Immunol, 81: 9-16, 2009），对HPV58型E7蛋白进行了线性表位完整且精细的扫描作图定位。

发明内容

本发明的目的在于提供人乳头瘤病毒（HPV）58型E7蛋白的抗原表位最小基序肽，并提供含有所述最小基序肽的短肽，同时提供所述基序肽含所述短肽的应用。