[发明专利]镰刀菌BYB2及其在微生物发酵制备阿拉伯胶酶中的应用

权利要求书

1.一株阿拉伯胶酶产生菌——镰刀菌(Fusarium sp.)BYB2，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，430072，保藏编号：CCTCC NO：M 2010087；保藏日期：2010年4月19日。

2.如权利要求1所述的镰刀菌BYB2在微生物发酵制备阿拉伯胶酶中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的应用为：将镰刀菌BYB2菌种接种至以阿拉伯胶为唯一碳源的适用于镰刀菌的液体产酶培养基中，25～35℃培养45～55h，获得含有阿拉伯胶酶的发酵液。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述应用如下：

(1)将镰刀菌BYB2菌种接种于斜面培养基，于25～30℃培养24～48h，得到活化后的镰刀菌菌种；所述的斜面培养基终浓度组成为：马铃薯150～250g/L，蔗糖或葡萄糖15～25g/L，琼脂18～22g/L，溶剂为水，pH 5～6；

(2)将步骤(1)活化培养后镰刀菌BYB2孢子接种至液体种子培养基中，于25℃～35℃、150～250r/min振荡条件下培养10～20h，得到种子液；所述液体种子培养基终浓度组成为：阿拉伯胶20～30g/L，酵母浸出粉3～10g/L，K₂HPO₄ 0.5～1.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5～1g/L，溶剂为水，pH 5.5～6.5；

(3)将步骤(2)种子液以1％～10％的体积比的接种量，移种到液体产酶培养基中，于25～35℃、150～250r/min振荡条件下培养45～55h，得到含阿拉伯胶酶的发酵液；所述液体产酶培养基终浓度组成为：阿拉伯胶25～35g/L，(NH₄)₂SO₄ 5～10g/L，K₂HPO₄ 0.5～1.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5～1g/L，KCl 0.5～1g/L，FeSO₄·7H₂O 0.01～0.03g/L，H₃BO₃ 0.01～0.03g/L，pH 5.5～7；

(4)将步骤(3)含阿拉伯胶酶的发酵液经过滤或者离心，分离除去菌丝体，所得清液即为阿拉伯胶酶的粗酶液。

5.如权利要求1所述的镰刀菌BYB2在水解阿拉伯胶制备L-阿拉伯糖中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述的应用为：以镰刀菌BYB2经发酵培养获得的阿拉伯胶酶为催化剂，以阿拉伯胶胶为反应底物，在pH 4～8的磷酸缓冲液中、于35～60℃下进行水解反应，制得所述L-阿拉伯糖。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述阿拉伯胶酶由如下方法获得：将镰刀菌BYB2菌种接种至以阿拉伯胶为唯一碳源的适用于镰刀菌的液体产酶培养基中，25～35℃培养45～55h，获得含有阿拉伯胶酶的发酵液。