[发明专利]抗人绒毛膜促性腺激素抗体-白介素2融合蛋白的制备及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及DNA重组技术和药物领域。更具体地，本发明涉及抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)β亚基单抗与人白细胞介素2(以下简称IL2)的融合蛋白，编码该融合蛋白的DNA序列，含该DNA序列的载体，含该载体的宿主细胞，以及该融合蛋白的制法和在治疗肿瘤等疾病中的应用。

背景技术

恶性肿瘤(癌症)是危害人类健康的重大疾病，在临床治疗癌症的过程中，对手术后残留肿瘤细胞的治疗是一个涉及预后情况的关键环节。尽管癌症的治疗技术和方案在不断改进，但癌症的复发仍然是一个棘手和致命的问题。由于各种毒副反应和有限的疗效，使得化疗方法有其局限性。因此，需要有一些更好的治疗方法来控制癌症发展或从根本上消除癌细胞。

细胞因子(Cytokine)是一类由机体的活化免疫细胞或其他细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白质的统称，具有调节细胞生理功能、介导炎症反应、参与免疫应答和组织修复等多种生物学效应。根据细胞因子的功能又分为如白细胞介素(Interleukin，IL)，集落刺激因子(Colony-stimulating Factor，CSF)，干扰素(Interferon)，肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor，TNF)等等。由于细胞因子对免疫功能具有调节作用，局部应用可以增强肿瘤的免疫原性，因而作为药物应用治疗肿瘤疾病。这些细胞因子在市场上都销售多年并显示出独特的治疗效果，其缺点是：在体内半衰期短、缺乏特异性。

例如，用细胞因子如白介素2(IL2)、IL12和GM-CSF等，进行全身性治疗，可通过激活机体的保护性免疫反应而杀死残留的肿瘤细胞，目前在临床上已取得了一定的疗效[1.Rosenberg，S.A.，et al，1998.Durability of complete responses in patients with metastatic cancer treated with high-dose interleukin-2：identification of the antigens mediating response.Ann.Surg.228：307；2.Ruef，C.，et al，1990.Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor：pleiotropic cytokine with potential clinical usefulness.Rev.Infect.Dis.12：41.；3.Tsung，K.，et al.，1997.IL-12 induces T helper 1-directed antitumor response.J.Immunol.158：3359.]。然而，全身性使用细胞因子，常常会出现系统性问题，即严重的毒副作用，而且在肿瘤部位又达不到有效的治疗剂量[Cohen，J.，1995.Clinical trials-IL-12 deaths-Explanation and a puzzle.Science 270：908；5.Maas，R.A.，et al，1993.Interleukin-2 in cancer treatment：disappointing or(still)promising？A review.Cancer Immunol.Immunother.36：141.]，因此治疗往往达不到理想的效果，该治疗技术正处于两难的境地。

如果能研究出一种既能为治疗肿瘤提供有效浓度，又能减少甚至避免全身性的毒性，将极大地推动细胞因子生物治疗技术的发展。

将细胞因子直接注射到肿瘤部位是一种解决方法[6.Cortesina，G.，et al，1988.Treatment of recurrent sequamous cell carcinoma of the head and neck with low doses of interleukin-2 injected penilymphatically.Cancer 62：2482；7.Maas，R.A.，et al，1991.Intratumoral low-dose interleukin-2 induces rejection of distant solid tumour.Cancer Immunol.Immunother.33：389.]，但要直接注射到肿瘤部位是很困难的，因而这一方法只适用于那些特定的、易达部位的肿瘤的治疗。