[发明专利]荧光图像产生方法、设备和程序

说明书

相关申请的参考

本申请要求2009年8月31日向日本专利局提交的日本优先专利申请JP 2009-200890的优先权，其全部内容结合于此以供参考。

技术领域

本申请涉及荧光图像产生方法、荧光图像产生设备和荧光图像产生程序，例如，适合用于观察组织切片领域。

背景技术

通常，在病理学领域，在生物样品使用之前将其固定至底基(例如，载玻片)并且以预定方式对生物样品染色。

在病理诊断中，首先用通过在组织切片上执行苏木素-伊红(HE)染色或在分泌物细胞上执行巴氏染色而形成的样品从形态学的角度来确定恶性肿瘤的存在。如果发现恶性肿瘤或具有恶性肿瘤的可疑位置，然后用通过在组织切片或分泌物细胞上执行荧光染色而形成的样品，从分子生物学角度来确定恶性肿瘤的存在、类型和阶段。

在这种样品储存较长的时间后，通常，出现质量变差和生物样品变色，并且，生物样品在显微镜下的可见度也降低。因为有时在除了产生样品的机构(例如医院)以外的实验室中诊断这种样品，所以通常用邮件发送生物样品，这花费一定的时间。

考虑到这种情况，提出一种用于以图像数据的形式储存生物样品的设备(例如，见日本未审查的专利申请No.2003-222801)。

顺便说一句，在获得放大至预定比例的整个生物样品的图像的情况中，难以对成像表面形成完整图像，因此，通常使用这样的技术：对生物样品切片并且将切片部分的放大部分连接在一起。因为此技术包括相对于样品的每个部分移动镜台以在样品上聚焦的步骤，所以花费更长的时间来连接各部分的放大部分。

发明内容

然而，在连接样品部分(执行了荧光染色)的放大图像的情况中，由于花费更长的时间来连接各部分的放大部分，所以，不仅使标记到靶的荧光材料的变色加速，而且使生物样品负担过大。

另一方面，不将执行了荧光染色的样品作为图像，因为其在未激发状态是透明和无色的，因此，难以基于图像的对比度在图像上聚焦。

因此，期望提供荧光图像获取方法、荧光图像获取设备和荧光图像获取程序，其能够在图像上聚焦，而不会使标记到靶的荧光材料的变色加速或者不会使生物样品负担过大。

在一个实施方式中，提供一种产生与生物样品相关的图像的方法。该方法包括基于第一荧光材料的荧光在生物样品上聚焦，其中，用第一荧光材料和第二荧光材料对生物样品染色；并且，基于第二荧光材料的荧光捕获图像，其中，第一和第二荧光材料具有不同的激发波长。

在一个实施方式中，在暗场成像模式下产生图像。

在一个实施方式中，在暗场成像模式和明场成像模式下产生图像。

在一个实施方式中，将图像捕获为完整图像。

在一个实施方式中，将图像捕获为部分图像。

在一个实施方式中，将图像捕获为多个部分图像，所述多个部分图像被连接以形成图像。

在一个实施方式中，由包括对聚焦和捕获的控制的数据处理单元控制图像产生。

在一个实施方式中，在聚焦之后，由数据处理单元驱动激发光源，以启动图像捕获。

在一个实施方式中，在预定位置聚焦生物样品的一部分。

在一个实施方式中，在可变位置聚焦生物样品的一部分。

在另一实施方式中，提供一种产生与生物样品相关的图像的设备。该设备包括：基部单元，被配置为容纳用具有不同激发波长的第一荧光材料和第二荧光材料染色的生物样品；第一光源，被配置为照射生物样品从而允许基于第一荧光材料的荧光聚焦生物样品；以及第二光源，被配置为照射生物样品从而允许基于第二荧光材料的荧光捕获图像。

在一个实施方式中，该设备进一步包括数据处理单元，被配置为用于控制图像产生，包括与基部单元、第一光源和第二光源通信。

在一个实施方式中，数据处理单元停止驱动第一光源，并开始驱动第二光源，以启动图像捕获。

在另一实施方式中，提供了计算机可读存储装置，用于储存指令使数据处理单元工作，从而基于第一荧光材料的荧光而在生物样品上聚焦，其中，用第一荧光材料和第二荧光材料对生物样品染色；并基于第二荧光材料的荧光捕获与生物样品相关的图像，其中，第一和第二荧光材料具有不同的激发波长。

在又一实施方式中，提供一种产生与生物样品相关的图像的方法。该方法包括以第一激发波长照射生物样品；在生物样品上聚焦；以第二激发波长照射生物样品；并捕获与生物样品相关的图像。