[发明专利]一种可降解二甲基甲酰胺的菌群富集方法

说明书

技术领域

本发明涉及环境微生物领域，尤其涉及一种可降解二甲基甲酰胺的菌群富集方法。

背景技术

二甲基甲酰胺(DMF)是一种化学性质稳定、沸点高、性能优良的有机溶剂，能与水及多数有机溶剂以任意比互溶，有“万能溶剂”之称，在工业生产中得到大量应用。由于DMF仅作为有机溶剂而不发生化学反应，在量上几乎没有损耗，全部进入废水中。DMF进入水中会导致生物化学耗氧量和氮含量增加，使水质迅速恶化。1gDMF产生1.54gCOD，0.01gBOD，BOD/COD值为0.0065，可生化性极差。因此寻找一种有效的方法来处理DMF废水是十分迫切的。高效优势菌以其成本低、二次污染少的特点，已受到重视并开始得到应用。但如何获得高效的优势降解菌群一直是废水生化处理中的一个难题。

高效降解菌在废水的生物处理中起着非常重要的作用，研究人员往往是从受污染的环境中分离到一些具有特殊降解能力的细菌、真菌种类，通过富集、驯化而培养起来。国外有学者为提高DMF的生物降解速率，用炼油厂、石化厂装置附近经常接触工业废水的土壤中分离出的微生物或泥土加到活性污泥中去。研究发现主要降解DMF的菌种为给出中文名称（Pseudomonas minuscula），给出中文名称（Pcrucivial）及革兰氏阴性菌，它们可将DMF作为碳、氮源而去除。

在自然环境中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起，当希望获得某一类微生物时，就必须从混杂的微生物类群中分离它，以得到只含有这一类微生物的纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。为了获得某类微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同而供给它适宜的培养条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长而抑制其他细菌生长的环境，从而淘汰其他不需要的微生物，再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或平板划线分离法等分离、纯化该微生物，直至得到较纯的菌株。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种可降解DMF的菌群富集方法，通过该方法能够为工业废水生化处理提供一种经济高效的可降解DMF的菌群。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

先将含可降解二甲基甲酰胺的菌的活性污泥加入到驯化期的培养基中进行驯化培养；再将驯化培养后的的活性污泥加入到二甲基甲酰胺与富集培养基的体积比为1：250的培养液中进行富集培养;最后将培养液在好氧条件下放置在恒温振荡箱中，保持恒温28℃至32℃、振荡频率150 rpm，振荡培养5至6天为一周期，在每一周期结束时，撇掉2/3的培养液，补充添加新鲜的富集培养基继续培养，共经过5个周期的培养。

进一步，驯化期的培养基组分为：K₂HPO₄  6.8g、KH₂PO₄  1.2 、MgSO₄.7H₂O  0.1g、MnSO₄.4H₂O  0.1g、CaCl₂.2H₂O  0.1g、FeSO₄.7H₂O  0.1g、Na₂MoO₇.2H₂O  0.006g和蒸馏水1000mL。

进一步，富集培养期的培养基组分为：KH₂PO₄  5g、CaCl₂.2H₂O  0.022g、MgSO₄.7H₂O  0.040g、FeCl₃.6H₂O  0.0075g、Na₂MoO₇.2H₂O  0.0011g、ZnSO₄.7H₂O  0.0007g、MnSO₄.4H₂O  0.0006g、CuSO₄.5H₂O  0.0006g、CoCl₂.6H₂O  0.0006g和蒸馏水1000mL。

进一步，在上述培养过程中用NaOH或H₂SO₄调节其pH为7.00。