[发明专利]小麦黄矮病毒的多重PCR检测的引物组和试剂盒无效
申请号: | 201010267642.X | 申请日: | 2010-08-31 |
公开(公告)号: | CN101921875A | 公开(公告)日: | 2010-12-22 |
发明(设计)人: | 吴云锋 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京亿腾知识产权代理事务所 11309 | 代理人: | 陈惠莲 |
地址: | 712100 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小麦 病毒 多重 pcr 检测 引物 试剂盒 | ||
1.一种利用多重PCR反应同时检测小麦黄矮病种群中PAV、GPV、GAV三种病毒的引物组,该引物组由如下三对引物组成:
第一对引物为PAV正反向引物
SEQ ID NO.1:5’-ATGAATTCAGTAGGCCGTAGG-3’
SEQ ID NO.2:5’-CTATTTGGCCGTCATCAAGTG-3’
第二对引物为:为GPV正反向引物
SEQ ID NO.3:5’-GGTCGCCCTTAGAAATG-3’
SEQ ID NO.4:5’-GCCTCGGTGATGAACTG-3’
第三对引物为:为GAV正反向引物
SEQ ID NO.5:5’-GTAGAAATAACCGCAGGAG-3’
SEQ ID NO.6:5’-GACTTGAGTATTCCACCTGA-3’。
2.一种利用多重PCR反应同时检测小麦黄矮病种群中PAV、GPV、GAV三种病毒的试剂盒,该试剂盒包含权利要求1所述的引物组,还包含进行多重PCR反应的试剂:浓度为0.4×-0.9×的缓冲液;浓度为0.1-0.5mM的dNTPs;浓度为1.0-3.5mM的Mg2+。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其中缓冲液浓度为0.4×、0.5×、0.6×、0.7×、0.8×或0.9×;dNTPs浓度为0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM或0.5mM;Mg2+浓度为1.0mM、1.5mM、2.0mM、2.5mM、3.0mM或3.5mM。
4.根据权利要求2所述的试剂盒,试剂盒中还包含Taq DNA聚合酶,TaqDNA聚合酶浓度为0.04U/μL-0.06U/μL。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其中缓冲液的浓度为0.9×,dNTPs的浓度为0.4mM,Mg2+的浓度为3.5mM,Taq DNA聚合酶的浓度为0.06U/μL。
6.根据权利要求2所述的试剂盒,其中3对引物之间的比例为PAV∶GPV∶GAV=2∶1∶1。
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