[发明专利]蛭弧菌蛭质体菌液在斑节对虾养殖中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种细菌的应用，特别涉及蛭弧菌蛭质体菌液在斑节对虾等海产品养殖中的应用。 

背景技术

斑节对虾(Penaeus monodon)俗称鬼虾、草虾、花虾、竹节虾、斑节虾、牛形对虾，联合国粮农组织通称大虎虾。是对虾中个体最大的一种，成熟个体一般体长22.5cm～32cm，体重137g～211g，为当今世界上虾类养殖普遍的品种之一。 

目前不排污的养殖方式，造成对虾的排泄物、残存饲料、浮游生物的残体等有机废物均在池塘中积累，到了养殖的中后期，不可避免地出现底质污染，水体质量下降，条件致病菌和致病菌增多，生态环境恶化，从而引发虾病的发生。因此，在养殖生产中寻求一种新的方法，既可减少换水，又可提高其存活率和生长率，是广大养殖者之所盼。 

中草药对斑节对虾生长性能具有无药物残留、经济效益高的优点，但有见效慢的缺点。抗生素对抑制病原微生物的繁殖，减少其代谢毒素对虾的毒害作用等方面起到了积极的作用，但是长期使用抗生素，特别是滥用抗生素，其种种弊端也逐渐显露出来。如破坏虾塘中自然生态平衡，对虾的机体免疫力产生不良影响，产生耐药性和药物残留等副作用，给养殖业和作为消费者的人类的健康都带来了潜在的危害。因此，开发一种简便易行、安全、优质、营养的无公害健康的斑节对虾养殖新技术已经成为当今社会的共识。 

蛭弧菌是寄生于其他细菌，并能导致宿主细菌裂解的一类细菌；比一般细菌小，能通过细菌滤器，有类似噬菌体的作用；革兰氏染色呈阴性，可以裂解包括副溶血弧菌、溶藻弧菌等引发虾病害的潜在致病菌。 

蛭弧菌的生活史可分为脱离宿主细菌、具有鞭毛、自由游泳的游泳体状态和在宿主细菌内生长发育的蛭质体状态。蛭弧菌游泳体侵入宿主时，在宿主细胞壁上产生一个孔隙，当蛭弧菌侵入到宿主的周质空间后孔隙重新封闭。游泳体失去鞭毛，和宿主细胞一起被称为″蛭质体″。与游泳体相比，蛭质体不仅具有制备、保存更为方便，环境耐受力强，作用时间虽略慢但更久的特点，同时还具有潜在的灭活疫苗功能。当蛭弧菌游泳体入侵宿主细胞后，宿主细胞的呼吸作用 (respiration)很快被停止。蛭弧菌也进入蛭质体状态，开始分泌多种酶，消解宿主细胞的大分子为小分子物质，进而整合为自身的营养物质，使自身生长，变长。最终，长条状的蛭质体分成很多短的节段，长出鞭毛，重新成为游泳体。之后，它们分泌必需的酶类，破壁而出，再次成为脱离宿主细菌、具有鞭毛、自由游泳的游泳体。在此蛭质体发育期间，蛭弧菌并不改变宿主细胞的表面结构，使原宿主仍具有免疫原性，可刺激生物体，产生免疫应答反应。这一功能使得应用蛭弧菌蛭质体于斑节对虾养殖中，可提高对虾抗病能力，有效预防对虾弧菌病。 

这些特性使得蛭弧菌蛭质体适合作为一种微生物制剂，以应用于对虾的养殖过程中。笔者通过实验，证明了蛭弧菌蛭质体在成虾养殖过程中能够明显地提高虾的存活率、免疫力以及促进虾生长。 

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的弊端，提供蛭弧菌蛭质体菌液在斑节对虾养殖中的应用方法。其特征按照养殖生态学原理，海洋生物的生长环境要求，生物之间的相互关系及无公害养殖标准，人工创造养殖环境，减少投入成本，提高斑节对虾免疫力，促进斑节对虾快速生长，提高经济效益。 

本发明的目的通过下述方案实现： 

蛭弧菌蛭质体菌液在斑节对虾养殖中的应用。 

所述蛭弧菌蛭弧菌为(Bdellovibrio sp.)BDFM05，于2009年8月7日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 209172。 

所述蛭弧菌蛭质体菌液在斑节对虾养殖中的应用是将饲料在蛭弧菌蛭质体菌液中浸泡15-45min。 

所述蛭弧菌蛭质体菌液在斑节对虾养殖中的应用是在水体中添加蛭弧菌蛭质体菌液，使水体中蛭弧菌蛭质体浓度为10¹～10⁷pfu/mL。 

所述蛭弧菌蛭质体菌液的制备方法为：