[发明专利]由禾谷镰刀菌引起的小麦根颈腐病苗期抗性鉴定方法

权利要求书

1.一种由禾谷镰刀菌引起的小麦根颈腐病苗期抗性鉴定方法，其特征在于：首先将被测小麦品种或品系的种子消毒后在培养皿中发芽，然后接种活化后的禾谷镰刀菌；将接种禾谷镰刀菌的小麦种子铺在灭过菌的湿纸巾中，包裹后在避光条件下保湿培养1～3天，然后在自然光照条件下自然生长11～13天，形成幼苗，在自然生长期间，当纸巾的表面包裹层出现干燥时，将纸巾的端缘置于蒸馏水中浸泡；最后对幼苗的根颈腐病进行鉴定，结果作为被测小麦品种或品系由禾谷镰刀菌引起的根颈腐病的病情指数。

2.根据权利要求1所述的由禾谷镰刀菌引起的小麦根颈腐病苗期抗性鉴定方法，其特征在于：活化后的禾谷镰刀菌是指：将禾谷镰刀菌菌种置于PDA固体培养基上活化，培养后以血球计调节菌液浓度至1×10⁶个孢子/mL；种子消毒是指：将被测小麦品种或品系的种子用1％NaClO溶液中消毒2min后，再用无菌水冲洗3次；培养皿中发芽是指：在垫有两层湿滤纸的培养皿中于22℃温度条件下发芽；接种活化后的禾谷镰刀菌是指：当芽长达4～6mm时，在含有体积比为0.1％的Tween 20、浓度为1×10⁶个孢子/mL的禾谷镰刀菌悬浮液中接种2min。

3.根据权利要求2所述的由禾谷镰刀菌引起的小麦根颈腐病苗期抗性鉴定方法，其特征在于：将禾谷镰刀菌菌种置于PDA固体培养基上活化是指：将禾谷镰刀菌菌种置于1/4强度PDA固体培养基上活化；1/4强度PDA固体培养基是由10g马铃薯葡萄糖琼脂粉，15g琼脂粉，加入1L蒸馏水，121℃高压灭菌20min后形成的。

4.根据权利要求1或2或3所述的由禾谷镰刀菌引起的小麦根颈腐病苗期抗性鉴定方法，其特征在于：所述的将接种禾谷镰刀菌的小麦种子铺在灭过菌的湿纸巾中，包裹后在避光条件下保湿培养是指：将灭菌过的纸巾平铺在经过消毒处理塑料盘上，用蒸馏水使其湿润，将已经接种禾谷镰刀菌的10粒相同品种或品系的小麦种子呈直线形状铺在纸巾上，芽的生长方向一致且指向纸巾边缘，芽与纸巾边缘的距离为1.8～2.5cm，将纸巾沿种子的排列方向从一端向另一端卷起来，放入避光的泡沫盒中，加入蒸馏水使纸卷充分湿润，在22℃环境下进行保湿培养；所述的在自然光照条件下自然生长是指：在22℃、每天自然光照12h条件下生长，在自然生长期间，当纸巾的表面包裹层出现干燥时，将种子根际一端的纸巾的端缘置于蒸馏水中浸泡10s；所述的对幼苗的根颈腐病进行鉴定，是以每张纸巾的10粒被测种子为一个重复，每个品种或品系的被测小麦种子的鉴定至少基于平行试验的三个重复的检测结果。

5.根据权利要求4所述的由禾谷镰刀菌引起的小麦根颈腐病苗期抗性鉴定方法，其特征在于：对幼苗的根颈腐病进行鉴定中，按病害严重度将病级分为0-5级，其中：

0级为叶鞘无发病症状；

1级为第一叶鞘病斑长度小于1.0cm；

2级为第一叶鞘病斑长度1.0-2.0cm；

3级为第一叶鞘病斑长度大于2.0cm，幼苗未出现萎蔫病症；

4级为幼苗出现萎蔫病症；

5级为幼苗死亡；

病情指数＝[∑(病情级别×该级株数)/(调查总株数×最高病级)]×100；

以同品种或品系的被测小麦种子中平行试验的各重复的病情指数的平均值作为该小麦品种或品系的最终鉴定的病情指数；

病情指数的标准为7个级别：免疫的指数为0；高抗HR的指数为＜20；抗R的指数为20.01～40.0；中抗MR的指数为40.01～60.0；中感MS的指数为60.01～70.0；感S的指数为70.01～80.0；高感HS的指数为80.01～100.0。