[发明专利]一种灵芝多糖及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及食用真菌领域，具体的说涉及一种灵芝多糖及其制备方法。

背景技术

灵芝又名仙草、神草，是一种扶正固本、滋补强壮的珍贵药用菌，灵芝多糖是灵芝最主要的活性成分之一。现代研究表明，灵芝多糖具有抗血栓、抗肿瘤、抗辐射、抗氧化、免疫调节、保肝、降压等作用。随着近年发现灵芝多糖有越来越多的生物活性，各种灵芝多糖产品开始也越来越多，但传统水提法工艺提取的灵芝多糖产品颜色深，杂质多，不利于作为功能性食品或药品进行进一步研究与开发。

发明内容

本发明首先提供了一种灵芝多糖，该灵芝多糖是用如下方法制备得到的：

①水提：将灵芝子实体粉碎、热煮，得到灵芝粗多糖水提液；

②超滤：灵芝粗多糖水提液通过超滤膜进行超滤，冷冻干燥后得到分子量为1-50万Da的灵芝粗多糖干品；

③脱色：分子量为1-50万 Da的灵芝粗多糖干品按照10-40%的重量比配制成水溶液，离心除去沉淀部分；然后加入阴离子交换树脂，进行脱色；

④冷冻干燥：脱色后的灵芝粗多糖水溶液，进行冷冻干燥，即可。

本发明使用的灵芝子实体由上海市农业科学院食用菌所（保藏号：食用菌所 2469）提供。

本发明使用的超滤膜为高分子聚合卷式超滤膜，滤芯材质为聚砜PS、聚醚砜PES、聚偏氟乙烯PVDF，具体是购自上海弗立特实业有限公司的UF-3530超滤膜。

本发明使用的阴离子交换树脂为：苯乙烯-二乙烯苯共聚体骨架，功能基团为-N(CH₃)₂，具体是购自沧州宝恩吸附材料科技有限公司的脱色1号树脂。

所述的阴离子交换树脂在进行脱色前，最好先进行下述步骤的预处理：将树脂用3-5%的HCl小流量淋洗至流出液呈酸性，浸泡2-4小时，然后放尽酸液，用去离子水漂洗至中性；再用3-5%的NaOH小流量淋洗至流出液呈碱性，浸泡4-8小时，然后放尽碱液，用去离子水漂洗至中性备用。

所述的用阴离子交换树脂进行脱色，具体为1-50万Da的灵芝粗多糖干品按10-40%的重量比配制成水溶液后，加入已预处理好的阴离子交换树脂，进行脱色。

所述的脱色可为静态脱色或动态脱色；

其中静态脱色的方法为：灵芝粗多糖水溶液加入阴离子交换树脂后(40mL灵芝粗多糖水溶液加入5mL树脂)，保持温度为25-50℃，pH为5-7，搅拌2-4h，即可；

其中动态脱色的方法为：灵芝粗多糖水溶液加入阴离子交换树脂后（40mL灵芝粗多糖水溶液加入10mL树脂），室温下，流速1-4BV/h，上样体积为6-10BV，（1BV：10mL），即可。

脱色后的灵芝粗多糖水溶液，使用冷冻干燥机进行冷冻干燥处理，最终得到颜色较浅的灵芝多糖产品。

本发明还提供了制备上述灵芝多糖的方法，该方法包括如下步骤：

①水提：将灵芝子实体粉碎、热煮，得到灵芝粗多糖水提液；

②超滤：灵芝粗多糖水提液通过超滤膜进行超滤，冷冻干燥后得到分子量为1-50万Da的灵芝粗多糖干品；

③脱色：分子量为1-50万 Da的灵芝粗多糖干品按照10-40%的重量比配制成水溶液，离心除去沉淀部分；然后加入阴离子交换树脂，进行脱色；

④冷冻干燥：脱色后的灵芝粗多糖水溶液，进行冷冻干燥，即可。

本发明提供的经过脱色的灵芝多糖，制备方法简便、适用于大规模生产。脱色率可达到80%以上，多糖保留率达到75%以上，并且该灵芝多糖的免疫活性显著提高，可刺激巨噬细胞生成一氧化氮（NO），且可刺激淋巴细胞增殖。

具体实施方式

实施例1 水提法制备灵芝粗多糖并对其进行超滤

将灵芝子实体用粉碎机粉碎成小块，按照1kg子实体加入20L水的比例加水，加热煮沸持续2h，之后用滤布（100目）过滤，滤渣重复上述步骤再提取一次后过滤，合并两次提取的滤液。滤液浓缩至10L后，将浓缩液转到UF-3530超滤膜上进行超滤（选用截留分子量为1万和50万Da的超滤膜），冷冻干燥最终得到1-50万Da的灵芝粗多糖干品。

实施例2 

1. 原料制备

实施例1的1-50万Da灵芝粗多糖干品按照15%质量比配制成溶液，离心除去沉淀部分。

2. 阴离子交换树脂预处理

用4%的HCl小流量淋洗至流出液呈酸性，浸泡3h，然后放尽酸液，用去离子水漂洗至中性；用4%的NaOH小流量淋洗至流出液呈碱性，浸泡6h，然后放尽碱液，用去离子水漂洗至中性。