[发明专利]用于凝胶色谱净化系统的切割二次进样净化装置及方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于凝胶色谱净化系统的切割二次进样净化装置及方法，具体说就是用于前处理净化的凝胶色谱净化系统的特殊进样方式，一次进样以后，设定切割收集某段时间的色谱柱流出物，然后再次进样，进行色谱柱分离，根据实际应用情况收集合并两次柱分离的流出产物。

背景技术

凝胶色谱(Gel Permeation Chromatography)，又称凝胶净化色谱，体积排阻色谱等(Size Exclusion Chromatography)SEC，简称GPC，是一项比较传统的分离技术，GPC的柱子由化学惰性的中空小球组成，利用空间排阻的原理对样品进行分离。

由于小分子化合物会从填料的孔中穿过，而大分子化合物从填料周围空间穿过，小分子与大分子之间由于所流经的路程差距，这样大分子与小分子会先后从柱子中流出，起到分离作用，由于这一分离技术不受样品的极性的影响，所以对于色谱用户来说，是一种非常有效解决色谱柱不能分开的样品的手段，尤其是对于脂肪类，蛋白质及色素类大分子干扰物，这些物质对于色谱柱，进样口来说非常危险。而在生物源样品当中的含量一般又比较高，那么在进行样品分析之前进行一步GPC净化就显得非常必要了。

针对一般的农药/兽药残留分析来说，样品基质中的大分子干扰物主要为色素，脂肪，蛋白质，多糖等生物源的干扰物，这类物质对于后面的色谱分析来说，是干扰较大的物质，不但会带来高的噪音，鬼峰，杂峰，而且会污染色谱的进样口，离子源，乃至整个分析系统，并对色谱柱和整套系统的寿命均有很大影响，虽然还有其他的方法进行净化，例如氧化铝柱，酸性硅胶柱等，但这类方法多数会对待分析样品有不同程度的吸附，从而使分析方法的回收率降低。

目前，凝胶色谱在净化样品使用中存在以下的缺点和不足，使之净化能力不足以满足实验需要，凝胶色谱柱除脂肪上样量偏小，容易柱饱和，影响分离效率，如传统使用的GPC色谱柱脂肪的上样量大概在0.5-1g左右，但分析动物性样品及油中的农残和兽残时，样品中脂肪的含量往往超过1g，那么传统的解决办法为减小取样量，这样会降低方法的灵敏度。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于凝胶色谱净化系统的切割二次进样净化装置及方法，即根据凝胶色谱的原理，物质会按照分子体积大小的顺序依次从凝胶色谱柱中顺序流出，大分子干扰物质会率先从凝胶色谱柱中流出，随后是小分子的目标化合物，那么对于一个GPC的方法来说，关键在于找出什么时间收集流出物，什么时间停止收集流出物，这样才能使目标化合物与干扰物质得到分离，以达到净化的目的。

本发明的技术方案如下：

一种用于凝胶色谱净化系统的切割二次进样净化装置，包括有高压注射针泵，其特征在于：所述高压注射针泵通过管道依次连接有第四阀体和第一阀体，所述第一阀体通过管道连接有由色谱柱、紫外可见光液相检测器、第三阀体和第二阀体串联组成的回路，第一阀体还分别连接有第一进样环、第二进样环，第一阀体通过管道连接有高压液相泵；所述第三阀体通过管道连接有进样针管。

一种用于凝胶色谱净化系统的切割二次进样净化方法，其特征在于：其具体包括以下步骤：选取高压注射针泵，通过管道依次连接第四阀体和第一阀体，第一阀体上通过管道连接有由色谱柱、紫外可见光液相检测器、第三阀体和第二阀体串联组成的回路，第一阀体上还分别连接有第一进样环、第二进样环，第一阀体上通过管道连接有高压液相泵，第三阀体通过管道连接有进样针管；

将进样针管移到待净化样品储液瓶的上方，由高压注射针泵泵入待净化样品，待净化样品通过管道流通进入第一进样环，由高压液相泵泵入洗脱溶剂，待净化样品与洗脱溶剂在第一进样环中进行混合，待第一进样环中充满待净化样品与洗脱溶剂的混合物后，调整各个阀体的阀门位置，待净化样品与洗脱溶剂的混合物流通进入色谱柱，从而使待净化样品中的干扰物质和目标物质在色谱柱中发生分离，此时其中的干扰物质和目标物质会先后从色谱柱中流出，待干扰物质先从色谱柱流出后，再对目标物质进行收集，直到目标物质完全从色谱柱中流出，而干扰物质从管路排出；