[发明专利]一种油田现场硝酸盐还原菌的检测方法

权利要求书

1.一种油田现场硝酸盐还原菌的检测方法，其特征是：硝酸盐还原菌检测包括检测瓶制作和油田现场检测；

1）硝酸盐还原菌检测瓶制作

（1）清洗

玻璃瓶清洗，橡胶塞和铝箔盖清洗，然后用清水漂清，再用蒸馏水将玻璃瓶、橡胶塞、铝箔盖清洗干净，空干残水；

（2）培养基配制

在常温常压下，培养基按硝酸盐还原菌测试瓶要求配制； 

（3）封装和灭菌

将配制的培养基用移液器装进玻璃瓶内，盖上橡胶塞和铝箔盖，再用压盖器将其压紧密封；将经加盖封口的测试瓶用高温蒸汽灭菌锅在100－140℃条件下进行高温灭菌10－30分钟；        

2）油田现场硝酸盐还原菌采用绝迹稀释法进行检测

检测油田现场待测水样中的硝酸盐还原菌的菌数时，将待测水样用无菌注射器逐级注入测试瓶中稀释培养，直到最后一个测试瓶无菌生长为止，根据稀释的倍数计算出待测水样中细菌的数目。

2.按照权利要求1所述的的油田现场硝酸盐还原菌的检测方法，其特征是：玻璃瓶清洗是将5－20mL玻璃瓶、橡胶塞和铝箔盖清洗是在洗衣粉水中清洗1－3次后于清水中漂洗，再用蒸馏水清洗，空干残水。

3.按照权利要求1所述的的油田现场硝酸盐还原菌的检测方法，其特征是：培养基的重量配方为蛋白胨0.5～1g,牛肉粉0.1～0.5g,酵母粉0.1～0.5g，氯化钠0.5～1g，硝酸钾0.05～0.3g，硝酸钠0.05～0.3g，硝酸铵0.05～0.2g，矿物质镁0.0002～0.001g，铁0.0002～0.0005g，蒸馏水100mL。

4.按照权利要求1所述的的油田现场硝酸盐还原菌的检测方法，其特征是：封装前，调节培养基溶液的pH值为7－7.6，将配制的培养基用移液器以4－18mL/瓶的量装进洗净的玻璃瓶内。

5.按照权利要求1所述的的油田现场硝酸盐还原菌的检测方法，其特征是：待测水样用无菌注射器逐级注入测试瓶中稀释培养步骤；

（1）准备数支已经过灭菌消毒干净的1mL医用注射器；

（2）捆绑数个测试瓶，作为一排硝酸盐还原菌测试瓶，依次编上序号；

（3）用注射器取1mL待测水样注入第1号测试瓶，充分震荡；另取一支注射器从第1号测试瓶内取1mL液体注入第2号测试瓶，充分震荡，以此类推到最后一个测试瓶；

（4）将注入油田现场水样的硝酸盐还原菌测试瓶进行实验室内培养，定期进行检测读数。