[发明专利]一种快速检测黄曲霉毒素含量的方法

权利要求书

1.一种快速检测黄曲霉毒素含量的方法，包括以下步骤：

(1)将待测样品粉碎后称取0.5～50g置于烧杯中，加入萃取剂10～100ml，振摇2～10min或超声萃取3～30min；所述的萃取剂为三氯甲烷、二氯甲烷、正丁醇、苯、异丁醇、异丙醇、甲基乙基酮、乙酸乙酯、四氢呋喃甲基异丁醇、醋酸丁酯、丙酮、乙腈或是甲醇浓度≥20％的甲醇乙腈混合物中的一种；

(2)萃取物过滤后固液分离，滤液在水浴45～85℃下浓缩、挥发，定容至1～5ml得供试品；

(3)在长度≥8cm的薄层硅胶板上分别点加同量的供试品和黄曲霉毒素B1标准品，然后分别在供试品和黄曲霉毒素B1标准品样点中点加5～30μl的衍生试剂；然后将薄层硅胶板上的供试品和黄曲霉毒素B1标准品用展开剂展开；

(4)待供试品和黄曲霉毒素标准品B1挥干后，在波长300～400nm紫外灯下对两者的荧光强弱进行比较，衍生后黄曲霉毒素B1为蓝紫色，如果供试品样点出现与黄曲霉毒素标准品B1颜色相同、比移值相同的荧光条带，且供试品的荧光强度强于黄曲霉毒素标准品B1，则表示供试品中黄曲霉毒素含量超标，否则即为合格。

2.根据权利要求1所述的快速检测黄曲霉毒素含量的方法，其特征在于：待测样品的称取质量按下式确定：待测样品质量＝(黄曲霉毒素B1标准品浓度μg/ml×供试品体积ml)/黄曲霉毒素的限量标准；其中，黄曲霉毒素的限量标准参考GB 13078-2001《饲料卫生标准》和GB 2715-2005《粮食卫生标准》；黄曲霉毒素B1标准品浓度为0.02～1μg/ml。

3.根据权利要求1所述的快速检测黄曲霉毒素含量的方法，其特征在于：所述的待测样品为饲料、花生、玉米，大米、小麦、豆类、坚果或辣椒类中的一种。

4.根据权利要求1所述的快速检测黄曲霉毒素含量的方法，其特征在于：将待测样品粉碎至过20目筛网。

5.根据权利要求1所述的快速检测黄曲霉毒素含量的方法，其特征在于：所述的衍生试剂为醋酸、盐酸、硝酸、硫酸、草酸、酒石酸、抗坏血酸、水杨酸、苹果酸或柠檬酸中的一种；其中，盐酸、硝酸和硫酸的浓度为体积百分数0.5～20％，其余酸的浓度为体积百分数0.5～50％。

6.根据权利要求1所述的快速检测黄曲霉毒素含量的方法，其特征在于：所述的展开方式为二次展开，展开剂分为1号展开剂和2号展开剂，其中，1号展开剂为乙醚、石油醚、己烷、环己烷或四氯化碳中的一种，2号展开剂为苯-丙酮、氯仿-丙酮、环己烷-乙酸乙酯或苯-乙酸乙酯的一种；二次展开的具体操作方式有两种：一种是：先使用1号展开剂竖向展开，然后再使用2号展开剂竖向展开，1号展开剂展开直径≥5cm，2号展开剂展开直径比1号展开剂展开直径小0.3～1.5cm；另一种是：先用1号展开剂横向展开，再用2号展开剂竖向展开。

7.根据权利要求1所述的快速检测黄曲霉毒素含量的方法，其特征在于：所述的供试品与黄曲霉毒素B1标准品点样总量相同，样点大小保持一致，直径在0.2～0.6cm；点样一次性点完或是少量多次点完。