[发明专利]一种从昆虫触角中分离鉴定OBPs基因的方法无效

专利信息
申请号: 201010285476.6 申请日: 2010-09-16
公开(公告)号: CN102399773A 公开(公告)日: 2012-04-04
发明(设计)人: 谷少华;张永军;张雪莹;吴孔明;郭予元 申请(专利权)人: 中国农业科学院植物保护研究所
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/68;G06F19/24
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王加岭;张庆敏
地址: 100093 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 昆虫 触角 分离 鉴定 obps 基因 方法
【权利要求书】:

1.一种从昆虫触角中分离鉴定气味结合蛋白基因的方法,其特征在于,包括步骤:

(1)利用SMART技术获得触角全长cNDA序列;

(2)Sfi酶双酶切所述ds cDNA;

(3)利用凝胶层析柱对酶切产物按片段大小进行分离,收集片段长度最长的ds cDNA;

(4)步骤(3)的ds cDNA和pDNR-LIB载体连接,得重组质粒;

(5)所述重组质粒转化ElectroMAX DH5α-E感受态细胞,得到未扩增的初始化cDNA文库;

(6)采用生物信息学的方法从cDNA文库中鉴别气味结合蛋白基因。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(6)中采用生物信息学的方法鉴别气味结合蛋白基因时,其中“Classical OBPs”的鉴别程序为:

C1-X20-66-C2-X3-C3-X21-43-C4-X8-14-C5-X8-C6;

C1-X15-39-C2-X3-C3-X21-44-C4-X7-12-C5-X8-C6;

“Plus-C OBPs”的鉴别程序为:

C1-X20-41-C2-X3-C3-X41-46-C4-X19-29-C4a-X9-C5-X8-C6-P-X9-10-C6a-X9-10

C1-X8-41-C2-X3-C3-X39-47-C4-X17-29-C4a-X9-C5-X8-C6-P-X9-11-C6a。

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