[发明专利]一种肿瘤靶向双载药递释系统及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属生物技术和药物制剂领域，涉及载药递释系统，具体涉及一种肿瘤靶向双载药递释系统，尤其涉及一种肿瘤靶向治疗基因与化疗药物双载药递释系统及其制备方法。

背景技术

临床肿瘤治疗研究显示，单一药物用于肿瘤治疗已不能彻底治疗肿瘤。分析其原因在于，由于肿瘤细胞具有一定的调节性，临床长期给予单一的药物，致使肿瘤细胞产生耐受性，导致药物失去肿瘤治疗作用，特别是单纯的化学疗法中，普遍存在多药耐药的弱点。因此，临床尝试采用联合药物治疗解决这一难题。化疗药物联合用药可以有效防止肿瘤细胞出现耐受性，提高药物的治疗作用。疗效的提高可以降低所需药物剂量，进而降低对人体正常组织的毒副作用。

目前，本领域对于基因药物和化疗药物联合用药已经显现出越来越浓厚的兴趣。联合药物治疗主要包括不同化疗药物的联合以及基因药物与化疗药物的联合。然而，联合用药的发展却受制于多次给药和繁琐的药物系统构建，特别是基因药物和化疗药物联合用药，需要分别构建系统来进行运载药物。因此，肿瘤联合用药成功的一个关键手段就是设计简单高效、高载药量的基因药物联合递释系统，在提高肿瘤治疗效果的同时，逆转耐药性并且降低毒副作用。目前，有研究利用胶束，脂质体和纳米粒等，将基因药物和化疗药物递送至发挥作用的位点，发挥作用，并且相互促进得到联合治疗效果，如；将抗肿瘤化疗药物阿霉素、肉红霉素或5—氟尿嘧啶插入到基因的碱基对形成复合物，该复合物可在血液中保持相对完整，阿霉素不会泄露。但较成功的一个载体可以同时递送基因药物和化疗药物的递送系统仍然很少。

有文献报道将高分子材料作为基因药物载体，树枝状高分子材料如聚酰胺—胺树状分枝物（polyamidoamine dendrimer，简称PAMAM）和聚赖氨酸（dendri-graft polylysines，简称DGL）是近年来出现的纳米级的合成高分子，高度分枝，呈单分散性，其末端氨基丰富，并易于经过适当的修饰连接靶向头基等生物活性物质，有望成为良好的药物载体，而由于这些树枝状高分子载体表面的氨基在生理条件下质子化，带正电荷，因此可考虑作为非病毒载体材料携载基因药物。

主动靶向是构建靶向递释系统的一个主要策略，利用特定的头基修饰系统，特异性结合特定细胞表面过度表达的受体以达到靶向输送的作用。研究显示，肿瘤细胞表面过度表达一系列受体，其中转铁蛋白受体被用作靶点已有较长的研究历史。但是，内源性转铁蛋白（transferrin，简称为Tf）浓度很高，约为25 mM，可与以转铁蛋白作为靶向头基的给药系统竞争肿瘤细胞表面的转铁蛋白受体，从而影响肿瘤靶向效率。

发明内容

本发明的目的是为克服现有技术中的不足，提供一种肿瘤靶向双载药递释系统，尤其涉及一种多肽修饰的肿瘤靶向治疗基因与化疗药物双载药递释系统及其制备方法。

本发明中，选用通过噬菌体展示技术筛选出的多肽修饰高分子材料，以多肽为靶向头基，高分子材料为基础高分子载体，通过静电作用与基因化疗药物复合物形成纳米递释系统。该递释系统以内吞方式进入细胞，提高肿瘤细胞对载药递释系统的摄取，并且安全。

具体而言，本发明的一种肿瘤靶向双载药递释系统，其特征在于，其由高分子材料、聚乙二醇、多肽、治疗基因和化疗药物制成。

本发明中，所述高分子材料与聚乙二醇的分子比为1：2～1：10；高分子材料与多肽的分子比为1：1～1：5；高分子材料与治疗基因的质量比为3：1～10：1；治疗基因与化疗药物的分子比为0.025：3000～8：3000。

本发明中，高分子材料为树枝状，其内部有空腔；本发明的一个实施例选用的高分子材料为聚酰胺—胺型树状分枝物和聚赖氨酸。

本发明中，治疗基因包括编码人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）蛋白的基因（pORF-hTRAIL）以及其它所有具有抗肿瘤效果的基因；所述化疗药物包括阿霉素，柔红霉素和5—氟尿嘧啶等可以插入到基因碱基对的抗肿瘤化疗药物。

所述的TRAIL蛋白能介导恶性肿瘤细胞的凋亡，其介导凋亡的机制是通过细胞表面凋亡受体调节的主动的外部的途径，这些凋亡受体在与凋亡配体结合后传导凋亡信号，另一方面，化疗药物介导的凋亡是典型的内部途径，如基因严重损坏，低氧，或者其他的细胞应激，因此，本发明通过联合化疗药物和编码TRAIL蛋白的基因能得到协同的杀肿瘤细胞效果。

本发明中，所述的载体系统采用多肽修饰树枝状高分子材料形成纳米粒，所述的多肽（T7）其氨基酸序列为HAIYPRH，该多肽为可特异性结合转铁蛋白受体的多肽，通过噬菌体展示技术筛选得到。