[发明专利]一种酶法合成Gal-sorbitol的方法无效
| 申请号： | 201010286820.3 | 申请日： | 2010-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN101979637A | 公开（公告）日： | 2011-02-23 |
| 发明（设计）人： | 曾晓雄;唐淑芬;叶红;李伟;孙怡 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12P19/14 | 分类号： | C12P19/14 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 21009*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 合成 gal sorbitol 方法 | ||
1.一种新型的合成Gal-Sorbitol的方法，其特征是利用乳糖和山梨糖醇为底物，在β-D-半乳糖苷酶的催化下合成Gal-Sorbitol，并分离纯化产物Gal-Sorbitol。
2.根据权利要求1所述的合成Gal-Sorbitol的方法，其特征在于底物的浓度为40％，而且底物乳糖和山梨糖醇的起始浓度比为1∶1。
3.根据权利要求1所述的合成Gal-Sorbitol的方法，其特征在于利用β-D-半乳糖苷酶制备Gal-Sorbitol时，适宜的反应条件为：反应温度40℃，pH为6.0，酶量为3U/mL，反应时间为4小时。
4.根据权利要求1所述的合成Gal-Sorbitol的方法，其特征在于产物Gal-Sorbitol的分离纯化方法为：反应液经沸水浴灭活10min后，加适量的去离子水稀释，经0.45μm滤膜过滤，滤液过活性炭-硅藻土(1∶1，w/w)中压层析柱。层析柱用一系列线性浓度梯度(0％～40％)的乙醇进行洗脱，洗脱液经苯酚硫酸法与HPLC法检测后，收集含Gal-Sorbitol的洗脱液，并浓缩、干燥，得到白色粉末状的Gal-Sorbitol。
5.根据权利要求1所述的合成Gal-Sorbitol的方法，其特征在于产物Gal-Sorbitol的结构鉴定方法为：纯化得到的Gal-Sorbitol样品进行1H-NMR、13C-NMR和ESI-TOF-MS分析。
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