[发明专利]一种耐热菌复合培养基及耐热菌的检测方法

说明书

技术领域：

本发明涉及固体食品中耐热菌的检测技术领域，具体地讲是一种耐热菌复合培养基及耐热菌的检测方法。

背景技术：

耐热菌是一类含有芽孢，经热加工仍然存活，适宜条件下孢子可活化为营养体从而导致食品腐败的细菌的总称；目前，对耐热菌的研究主要涉及果汁中嗜酸耐热菌等，其检测方法与试剂皆针对液体食品，不适合固体食品中耐热菌的检测；现有标准SN 0178《出口食品嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)计数方法》中使用葡萄糖胰蛋白胨琼脂，但是葡萄糖胰蛋白胨琼脂耐热菌检出率较低。

发明内容：

本发明的目的是克服上述已有技术的不足，而提供一种耐热菌复合培养基。

本发明的另一目的是提供一种耐热菌的检测方法。

本发明主要解决现有的培养基用于检测固体食品中的耐热菌检测结果不准确的问题。

为了达到上述目的，本发明是这样实现的：一种耐热复合菌培养基，其特殊之处在于它含有下述百分重量配比的原料：胰蛋白胨10～20％、细菌琼脂粉50～70％、牛肉膏1～10％、酵母膏1～10％、葡萄糖1～10％、溴甲酚紫0.1～0.9％、复合维B 0.1～0.9％、硝酸钙0.1～0.9％、吐温80 1～10％。

本发明的一种耐热菌复合培养基，其较好的百分重量配比为：胰蛋白胨12～17％、细菌琼脂粉55～65％、牛肉膏4～7％、酵母膏8～10％、葡萄糖2～5％、溴甲酚紫0.1～0.5％、复合维B 0.6～0.9％、硝酸钙：0.6～0.9％、吐温80 2～5％。

本发明的一种耐热菌复合培养基，其最佳的百分重量配比为：胰蛋白胨15％、细菌琼脂粉60％、牛肉膏6％、酵母膏9％、葡萄糖4％、溴甲酚紫0.4％、复合维B 0.8％、硝酸钙：0.8％、吐温80 4％。

本发明的一种耐热菌的检测方法，其特殊之处在于样品稀释液置于实验试管中，同时设置温度对照试管，水浴温度控制在74℃±2℃，当对照试管温度上升至74℃时，开始计时，水浴10min，每隔3min摇动试管一次，加热完毕，取出实验试管冷却，然后接种实验试管稀释液，倾倒耐热菌复合培养基，于36℃±1℃的培养箱内培养48h±2h，计数，得耐热菌的检测结果。

本发明的耐热菌复合培养基各成分作用原理如下：

胰蛋白胨：低分子肽，游离氨基酸，提供营养基础。

酵母膏：提供维生素和氨基酸。

葡萄糖：提供营养。

吐温80：表面活性剂，降低菌表面和培养基的表面张力，使营养物质更易吸收。

细菌琼脂粉：凝固剂。

溴甲酚紫：指示剂。

牛肉膏(可用肉浸液代替)：提供营养物质和微量的金属元素。

复合维B：提供B类元素，芽孢构成的成分。

硝酸钙：酶反应促进，菌体成分构成，增加耐热性。

本发明所述的一种耐热菌复合培养基及耐热菌的检测方法与已有技术相比具有突出的实质性特点和显著进步：采用耐热菌复合培养基可准确检测热加工中心温度条件下固体食品中残存的耐热菌数量，检出率比市售培养基(葡萄糖胰蛋白胨琼脂)高20％，且菌落特征显著，易于计数。

具体实施方式：

为了更好地理解与实施，下面结合实施例详细说明本发明。

实施例1，准确地称取胰蛋白胨1.5g、细菌琼脂粉6.0g、牛肉膏0.6g、酵母膏0.9g、葡萄糖0.4g、溴甲酚紫0.04g，复合维B 0.08g、硝酸钙：0.08g、吐温80 0.4g，混合后为耐热菌培养基。

实施例2，准确地称取胰蛋白胨1.2g、细菌琼脂粉6.5g、牛肉膏0.4g、酵母膏0.8g、葡萄糖0.5g、溴甲酚紫0.05g，复合维B 0.06g、硝酸钙：0.09g、吐温80 0.4g，混合后为耐热菌培养基。

实施例3，准确地称取胰蛋白胨1.7g、细菌琼脂粉5.5g、牛肉膏0.7g、酵母膏1g、葡萄糖0.44g、溴甲酚紫0.01g，复合维B 0.09g、硝酸钙：0.06g、吐温80 0.5g，混合后为耐热菌培养基。

实施例4，准确地称取胰蛋白胨1.6g、细菌琼脂粉6.3g、牛肉膏0.5g、酵母膏1g、葡萄糖0.2g、溴甲酚紫0.05g，复合维B 0.09g、硝酸钙：0.06g、吐温80 0.2g，混合后为耐热菌培养基。

实施例5，准确地称取胰蛋白胨1g、细菌琼脂粉5g、牛肉膏1g、酵母膏1g、葡萄糖0.89g、溴甲酚紫0.09g，复合维B 0.01g、硝酸钙：0.01g、吐温80 1g，混合后为耐热菌培养基。