[发明专利]山楂酸的抗结肠癌作用及其药物制剂

说明书

技术领域

本发明是涉及山楂酸（Maslinic acid）在抗结肠癌药物方面的应用及其药物制剂，属于中药领域。

背景技术

  山楂酸（Maslinic acid）是五环三萜类化合物。主要提取来源红枣、橄榄、山楂、石榴和鼠尾草等。

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的常见病和多发病，抗癌药物的开发已成为本世纪新药研究的重大课题。目前，从植物中寻找高效低毒的抗肿瘤药物，已成为国内外抗肿瘤药物研究的重点。我们在筛选抗肿瘤药物过程中发现山楂酸具有很强的抑制结肠癌细胞和实体瘤生长的作用。

在本发明之前未发现以山楂酸为原料制备药物剂型并用于预防和治疗结肠癌疾病的报道。山楂酸几乎无毒，中药资源极为丰富，是一种非常有前途的抗肿瘤药物。

山楂酸别名：(2alpha,3beta)-2,3-二羟基齐墩果-12-烯-28-酸；马斯里酸；2a-羟基齐墩果酸。分子量：472.7；分子式：C₃₀H₄₈O₄。

化学结构式：

发明内容

本发明的目的之一是提供了山楂酸的药物制剂；

本发明的目的之二是提供了山楂酸的抗肿瘤新用途。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明的药物制剂含有1%-99%的山楂酸和99%-1%的赋形剂（包括其它配用的药物），优选含有20%-80%的山楂酸和80%-20%的赋形剂（包括其它配用的药物），最好含有60%-70%的山楂酸和40%-30%的赋形剂（包括其它配用的药物）。

按药剂学方法，可以将本发明的山楂酸制备成多种临床药物剂型作为抗结肠癌药物，包括口服制剂或非肠道给药的剂型。所说的口服制剂选于片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、微囊片剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种；所说的非肠道给药剂型选自于注射剂、气雾剂、栓剂或皮下给药剂型当中的一种。

本发明的抗结肠癌药物中的辅料是指常规的赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂等。本发明的抗肿瘤药物中的其它配伍用的药物，指的是以有效剂量的山楂酸为一定的药物原料，再配伍其它已允许合用的中药或化学药品。

本发明的山楂酸药物制剂具有抗结肠癌作用，是通过以下的药效学试验得到证实的。

试验例1 考察了山楂酸对体外结肠癌细胞的抑制作用

细胞：人结肠癌细胞（HCT-116）。为中科院海洋所海洋药物实验室提供。

药品及试剂：山楂酸（Maslinic acid）中科院海洋所海洋药物实验室提供，白色粉末；5-氟脲嘧啶（5-FU）江苏南通精华制药有限公司产品，批号为100402； MTT（SIGMA，USA）；DMSO（SIGMA，USA）；胰蛋白酶（SIGMA，USA）；RPMI1640（GIBCO，Invitragen Co.，USA）；DMEM（GIBCO，Invitragen Co.，USA）；优级胎牛血清（GIBCO，Invitragen Co.，USA）；特级胎牛血清Fetal Bovine Serum（Hyclone）。 

仪器：超低温冰箱（Nature，USA），细胞培养箱（SANYO，Japan），倒置显微镜（NIKON，Japan），酶标仪（Bio-Tek Instruments，Inooski，VT，USA），PH计（Thermo orion，USA），超净工作台（FLC-哈尔滨东联仪器厂）。

实验方法MTT法：将肿瘤细胞株按照常规方法培养传代，收集对数生长期细胞，调节细胞悬液浓度5×10⁴个/ml左右。将细胞悬液加入96孔培养板中，每个孔加入180 μl。置于37℃恒温培养箱中培养24 h后，实验组加入各浓度山楂酸（以5-FU作为阳性对照组）20μl/孔，每组各设4个平行孔，并设空白孔（只加入溶解药用的溶剂）以调零。在培养箱37℃，培养48 h后，用移液枪将96孔板中液体洗净后每孔加入MTT（1 mg/ml）30 μl，置CO₂培养箱37℃ 培养4 h，弃去上清，每孔加入DMSO 150 μl，置摇床摇匀30 min，用酶标仪在492 nm下检测，利用SPSS统计软件，计算细胞死亡率，求取IC₅₀。

试验结果表明，经SPSS软件统计，不同浓度的山楂酸对用于试验的人结肠癌细胞（HCT-116）有不同程度的抑制作用，并且呈一定的剂量依赖关系，不同浓度的山楂酸对结肠癌细胞的抑制率、IC₅₀值详见表1。

表1 不同浓度的山楂酸对结肠癌细胞的抑制率